No abstract

Предложен способ модификации мишени для МАLDI-МS-анализа, позволяющий селективно выделять аналиты из биологических образцов непосредственно на поверхности мишени, как альтернатива классическим методам. Для модификации мишени суспензию металл-аффинного сорбента на основе оксида железа(III) в 50% водно-метанольном растворе электрораспыляли в бескапельном режиме c динамическим делением потока жидкости при атмосферном давлении в нормальных условиях. МАLDI-мишень выступала в качестве противоэлектрода. На МАLDI-мишень наносился слой сорбента в виде пятна, частицы которого в дальнейшем устойчивы к воздействию растворителей. На модифицированной МАLDI-мишени проводилось металл-аффинное обогащение фосфорилированного пептида с аминокислотной последовательностью SSNGHV(pY)EKLSSI из образца триптического гидролизата глобина человека. МАLDI-масс-спектр записывали с пятна сорбента. Такая методика создана в качестве альтернативы трудоемкой пробоподготовке биопроб и позволяет ограничиться минимальными объемами образца и растворителей.

The influenza NS1 protein is involved in suppression of the host immune response. Recently, there is growing evidence that prion-like protein aggregation plays an important role in cellular signaling and immune responses. In this work, we obtained a recombinant, influenza A NS1 protein and showed that it is able to form amyloid-like fibrils in vitro. Using proteolysis and subsequent mass spectrometry, we showed that regions resistant to protease hydrolysis highly differ between the native NS1 form (NS1-N) and fibrillar form (NS1-F); this indicates that significant structural changes occur during fibril formation. The discovery of the ability of NS1 to form amyloid-like fibrils may be relevant to uncovering relationships between influenza A infection and modulation of the immune response.

This manuscript describes the chemical synthesis of a compound similar to fluorene and Congo red, including characterization of its spectral properties. It was shown that the dye, during interaction with amyloid-like fibrils of several proteins (lysozyme, insulin, and beta-2microglobulin), has the ability to change fluorescent spectrum. In contrast, monomeric forms of these proteins did not induce significant spectral changes.