Objetivo: El presente estudio tuvo como objetivo investigar la prevalencia de Staphylococcus aureos aislado de las manos de profesionales de la salud en el Hospital Municipal de Governador Valadares, Minas Gerais (Brasil). Métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptivo, cuantitativo en mayo de 2018. La muestra consistió en 103 (ciento tres) profesionales de la salud, incluidos médicos, enfermeras, técnicos de enfermería, técnicos de radiología y fisioterapeutas. La identificación de Staphylococcus aureus se llevó a cabo utilizando agar manitol para el aislamiento de las muestras y mediante las pruebas de catalasa, coagulasa y ADNsa para identificarlas. Resultados: De los 103 profesionales evaluados, 21 fueron colonizados, mostrando una prevalencia del 20,39%. Para determinar la sensibilidad de las muestras, se utilizó el método de difusión en disco en Ágar, donde el 100% de las cepas eran sensibles al linezolid, siendo la azitromicina el antimicrobiano con la mayor resistencia 83,33%. Conclusión: Fue posible demostrar que, la higiene de las manos promueve una reducción considerable de la presencia de Staphylococcus aureos. Por lo tanto, la formación de profesionales, en el cumplimiento de las prácticas de higiene, asociadas con el cuidado en la prescripción de antimicrobianos, contribuye a la prevención de la propagación de estos microorganismos.