No abstract

Aim:  Topoisomerases represent a class of nucleic enzymes involved in the DNA replication, transcription and also chromosome topological formation. Topoisomerase IIa (Topo Iia – gene location 17q21) inhibition promotes cell death and for this reason, it is a target for specific chemotherapy (anthracyclines, podophyllotoxines). Our aim was to investigate the potential prognostic significance of its protein expression in squamous cell carcinomas of the tongue (TSCCs) based on a quantitative, digital image analysis method. Materials and methods:  We analysed immunohistochemically eighty‐seven (n = 87) archival, primary TSCCs using a monoclonal anti‐Topo IIa antibody. A computerised image analysis assay was applied for the evaluation of the results [nuclear labelling index (NLI)]. Survival analysis was also performed. Results:  Topo IIa protein was overexpressed in 48/87 (55.1%) cases. High NLI values were detected in 17/48 (35.4%), whereas moderate levels of expression were detected in 31/48 (64.6%) cases. Statistical significance was not assessed correlating overall protein expression to grade or stage of the examined tumours (P = 0.88, P = 0.73, respectively), but only to the anatomical region (P = 0.04). Cox regression analysis showed that Topo IIa and also the size of the tumours were strongly associated to the survival of the patients (P = 0.01, P = 0.02, respectively). Conclusions:  Topo IIa protein overexpression is a frequent event in TSCCs. Topo IIa may be used as a prognostic factor and also as a basis for targeted chemotherapy strategies in TSCCs. Furthermore, digital image analysis improves the quantification of immunohistochemical stains in an accurate and fast way.

No abstract

Ο ρυθμός του κυτταρικού πολλαπλασιασμού επηρεάζει τη βιολογική συμπεριφορά διαφόρων νεοπλασμάτων. Σχετικά με το ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα της γλώσσας, τα αποτελέσματα που αφορούν την ενδοκυττάρια έκφραση πολλαπλασιαστικών δεικτών, όπως είναι η πρωτεΐνη ki67, ποικίλλουν στις διάφορες ερευνητικές εργασίες. Μια άλλη πυρηνική πρωτεΐνη, η τοποϊσομεράσηΙΙα (topolla), μοριακού βάρους 170 Kda εκφράζεται στα πολλαπλασιαζόμενα κύτταρα. Η ανίχνευση του συγκεκριμένου μορίου ξεκινά προς το τέλος της S φάσης του κυτταρικού κύκλου και μεγιστοποιείται κατά τις G2 και Μ φάσεις. Κυρίαρχος είναι ρόλος της topolla στη συμπύκνωση των χρωμοσωμάτων. Σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η μελέτη της πολλαπλασιαστικής δραστηριότητας του ακανθοκυτταρικού καρκινώματος της γλώσσας, μέσω της ποσοτικοποιημένης ανοσοϊστοχημικής έκφρασης των πολλαπλασιαστικών πρωτεϊνών ki67 και topolla από τα νεοπλασματικά κύτταρα, με στόχο τη συσχέτιση της έκφρασης των ανωτέρω πρωτεϊνών με την κλινική συμπεριφορά και την πρόγνωση του όγκου. Το υλικό της μελέτης αποτέλεσαν κύβοι παραφίνης χειρουργικών εκτομών 87 περιπτώσεων πρωτοπαθούς ακανθοκυτταρικού καρκινώματος της γλώσσας. Για την κάθε περίπτωση συνελέγησαν στοιχεία που αφορούσαν κλινικά και παθολογοανατομικά χαρακτηριστικά του νεοπλάσματος. Για την ανοσοϊστοχημική μελέτη της πρωτεϊνικής έκφρασης χρησιμοποιήθηκαν τα μονοκλωνικά αντισώματα: anti-ki67 (ΜΙΒ1) και anti-topolla (KISI). Για την αξιολόγηση των ανοσοϊστοχημικών δεδομένων μετρήθηκε στατιστικά ο «δείκτης πυρηνικής πρωτεϊνικής έκφρασης», με την εφαρμογή του ημιαυτόνομου συστήματος ανάλυσης εικόνας. Μεταξύ των στατιστικών δοκιμασιών που χρησιμοποιήθηκαν στην παρούσα μελέτη, περιελήφθησαν και μέθοδοι «ανάλυσης επιβίωσης». Σύμφωνα με τα αποτελέσματα, το 56,3% των περιπτώσεων υπερέκφραζαν την πρωτεΐνη ki67, η οποία επιπλέον συσχετίστηκε θετικά με το μέγεθος του όγκου, σε βαθμό στατιστικά σημαντικό (p=0,05). Υπερέκφραση της topolla εμφάνισε το 55,1% των εξετασθέντων νεοπλασμάτων. Σύμφωνα με την μονοπαραγοντική μέθοδο ανάλυσης επιβίωσης (cox regression analysis), η υπερέκφραση της των πρωτεϊνών ki67 και topolla, συσχετίστηκε με την κακή πρόγνωση του νεοπλάσματος σε βαθμό στατιστικά σημαντικό (p=0,017 και p=0,011 αντίστοιχα). Το μέγεθος του όγκου συσχετίστηκε με τον χρόνο επιβίωσης των ασθενών σε βαθμό στατιστικά σημαντικό (p=0,024). Η αντίστοιχη συσχέτιση του σταδίου της νόσου σύμφωνα με το σύστημα ΤΝΜ, ήταν στατιστικά οριακά μη σημαντική (p=0,095). Σύμφωνα με την πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης, ανεξάρτητοι προγνωστικοί δείκτες του ακανθοκυτταρικού καρκινώματος της γλώσσας αναδείχτηκαν η ποσοτικοποιημένη ανοσοϊστοχημική έκφραση topolla των νεοπλασματικών κυττάρων και του μέγεθος του όγκου. Συμπερασματικά, σύμφωνα με τα αποτελέσματα της παρούσης μελέτης, τα νεοπλασματικά κύτταρα του ακανθοκυτταρικού καρκινώματος της γλώσσας υπερεκφράζουν τις πολλαπλασιαστικές πρωτεΐνες ki67 και topolla. Η ανοσοϊστοχημική έκφραση τόσο της ki67, óσo και της topolla των κυττάρων του όγκου καθώς και το μέγεθος αυτού, δύνανται να χρησιμοποιηθούν ως αξιόπιστοι προγνωστικοί δείκτες του συγκεκριμένου νεοπλάσματος. Ως ανεξάρτητοι δε προγνωστικοί δείκτες αναδεικνύονται: α) η ανοσοϊστοχημική έκφραση topolla των νεοπλασματικών κυττάρων και το μέγεθος του όγκου. Επιπλέον το ημιαυτόνομο σύστημα ανάλυσης διεπιστώθηκε πως αποτελεί αξιόπιστη και ταχεία μέθοδο αξιολόγησης των ανοσοϊστοχημικών δεδομένων στο σύγχρονο παθολογοανατομικό εργαστήριο.