Ultrastructural investigation of human sperm in its natural environment (without fixation, dehydration, embedding, sectioning, etc.) was carried out by using atomic force microscope (AFM) in its tapping mode. This technique permits the examination of fine structural details of undamaged sperm and its topography with precision. Moreover, it allows 3D reconstruction of images and enhances the contrast to resolve details such as mitochondria that surround the axoneme at the sperm middle piece. An organized structure has been found in the flageller axoneme region. Ultrastructure also reveals folding and details of the depression of the membrane that cannot be examined with conventional techniques.
Se determinó la relación existente entre la estructura morfológica de la glándula mamaria y los rasgos morfométricos corporales de 266 cabras criollas Motilona de la región Norte de Santander (Colombia) pertenecientes a sistemas orientados a la producción de leche y carne. Se evaluaron características morfológicas de la glándula mamaria como: vista lateral y posterior de las extremidades posteriores, inserción anterior y profundidad de la ubre, altura y anchura de inserción posterior de la ubre, ligamento suspensor, diámetro e implantación de los pezones. Los rasgos morfométricos corporales evaluados corresponden a la longitud de la cabeza y cara, anchura de la cabeza, alzada de la cruz, anchura de la grupa, diámetro longitudinal, dorso esternal y bicostal, longitud de la grupa, perímetro de la caña y tórax. Adicionalmente, se registró el peso vivo de los animales. Se estimaron los coeficientes de correlación de Pearson. Los resultados mostraron que existe una correlación positiva entre los rasgos morfométricos corporales y el peso vivo de los animales. Las correlaciones entre el peso vivo de los animales y los rasgos morfológicos de la glándula mamaria fueron bajas para la anchura de inserción posterior de la ubre y el ligamento suspensor de la ubre; y para los demás rasgos no fueron significativas. Este estudio sugiere que la población de cabras Motilona presenta un alto grado de homogeneidad en sus rasgos y su estructura morfológica es apropiada para la producción de leche.
El estudio evaluó la motilidad espermática y su efecto postdescongelación en semen caprino, en dos medios comerciales (Andromed® y TwoStep®) y diferentes protocolos de congelación (medio completo, con adicción del 10% de yema de huevo, semen centrifugado y sobrenadante seminal), se utilizaron machos de la raza alpina de la Universidad Francisco de Paula Santander Ocaña, el semen fue colectado con electroeyaculador, una vez los medios terminados y parte de los contenidos seminales enteros o centrifugados mezclados, se estabilizó por 2 horas, se envasó en pajillas de 0,5 cc y se congela en vapores de nitrógeno por 10 minutos, las pajillas se llevaron al laboratorio de Andrología de la Universidad del Zulia y por medio del sistema C.A.S.A.(Computer Assisted Sperm Análisis) se evaluaron los parámetros de motilidad como velocidad curvilínea (VCL), velocidad rectilínea (VSL), velocidad lineal (VAP), índice de linealidad (LIN), índice de rectitud (STR), índice de oscilación (ALH), Amplitud media del desplazamiento lateral de la cabeza del espermatozoide (BCF), los datos fueron analizados por medio del procedimiento GLM de SAS versión 9.0; los mejores índices de motilidad (VCL, ALH, BCF) fueron expresados enel tratamiento de contenido seminal centrifugado en medio Andromed®. (p≤0,001))La mejor progresividad espermática (VSL,LIN,STR)se presentó el tratamiento de Semen completo de caprino, criopreservado en medio comercial TwoStep®. ABSTRACT The study evaluated the effect sperm motility and sperm post-thawing in goats, two commercial means (Andromed ® and Two Step ®) and different freezing protocols (complete medium with 10% addition of the egg yolk, semen centrifuged supernatant and seminal ), we used males of the Alpine race of the University Francisco de Paula Santander Ocaña, semen was collected with electroejaculator once finished media and part of the whole and centrifuged seminal contents mixed, stabilized by two hours, packed in 0.5 cc straws and frozen in nitrogen vapor for 10 min, the straws were taken to the laboratory of Andrology at the University of Zulia and through CASA system (Computer Assisted Sperm Analysis) were evaluated motility parameters such as curvilinear velocity (VCL), straight line velocity (VSL), linear velocity (VAP), linearity index (LIN), straightness index (STR) Oscillation Index (ALH ) average amplitude of the lateral displacement of the sperm head (BCF), the data were analyzed by the GLM procedure of SAS version 9.0, the highest rates of motility (VCL, ALH, BCF) were expressed in the treatment of seminal content centrifugation Andromed ® medium. (p ≤ 0.001)) The best progressive sperm (VSL, LIN, STR) will present the full Semen treatment goats, cryopreserved at Two Step ® commercial medium.Keywords: semen, buck, Andromed, Two step.
Sobrevivência in vitro de blastocistos Mus domesticus domesticus vitrificados em macro ou microvolume de crioprotetor * ALEXANDER NIVIA OSUNA José Luiz Rodrigues (Orientador-UFRGS) Banca: Marcelo Bertolini (UDESC), Alexandre Tavares Duarte de Oliveira (UFCSPA), Rui Fernando Félix Lopes (UFRGS), Adriana Bos Mikich (UFRGS) O desenvolvimento de protocolos eficientes para a vitrificação de embriões mamíferos ainda é um desafio para os especialistas em reprodução. Soluções crioprotetoras de baixa toxicidade, associadas a técnicas seguras de envase, são fatores fundamentais para proporcionarem uma eficiente identificação e controle sanitário das amostras. Dois experimentos foram realizados para determinar a taxa de sobrevivência de embriões Mus domesticus domesticus envasados em palhetas convencionais (0,25 mL), na presença de uma haste metálica de ouro, empregando soluções crioprotetoras descritas para a vitrificação em microvolume. No experimento 1, avaliou-se a toxicidade da solução de desidratação (SD: PBSm + 10% EG + 10% PROH + 0,5 M sacarose), expondo os embriões por diferentes tempos: 1 (T1), 3 (T2) ou 10 min (T3). A toxicidade da solução de vitrificação (SV: PBSm + 20% EG + 20% PROH) foi determinada pela exposição dos embriões durante 25, 60 ou 180 seg, previamente desidratados por 1 ou 3 min. No experimento 2, avaliou-se a utilização do macrovolume (palhetas com a haste de ouro) e microvolume (micropipetas de vidro-GMP) na vitrificação dos blastocistos expostos à SV por 25 seg, previamente desidratados por 1 ou 3 min. Os dados foram analisados pelo teste Qui-Quadrado (P < 0,05). No experimento 1, não foi observada diferença estatística entre as taxas de eclosão dos embriões desidratados: T1 = 68% (38/56), T2 = 72% (36/50), T3 = 71% (39/55) e o grupo-controle, (74%-48/65). No entanto, houve diferença significativa (P < 0,05) na taxa de eclosão em relação ao tempo de exposição dos embriões à SV. Os embriões desidratados por 1 ou 3 min, e expostos à SV por 25 seg, proporcionaram maiores taxas de reexpansão (79% vs. 84%) e de eclosão (58% vs. 72%), em relação aos tempos de exposição de 60 e 180 seg. No experimento 2, após a vitrificação dos embriões envasados nas palhetas com a haste de ouro, a taxa de eclosão dos blastocistos previamente desidratados por 1 min foi de 16% (10/64) e de 4% (2/57) quando previamente desidratados por 3 min. Por outro lado, os embriões envasados nas GMP, e previamente desidratados por 3 min, foram os que apresentaram maior taxa de eclosão (60%-52/86). A vitrificação de embriões utilizando soluções crioprototetoras descritas para microvolume não foi eficiente na crioproteção dos blastocistos envasados em palhetas convencionais com a haste de ouro.
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