Poco se conoce sobre los conocimientos sobre tuberculosis (TB) en Cali, segunda ciudad colombiana con mayor carga de la enfermedad. Esta investigación buscó determinar el grado de conocimientos sobre TB en usuarios del transporte masivo. Se realizó un estudio descriptivo de corte transversal aplicando un cuestionario a usuarios de 12 estaciones principales del sistema de transporte público en un día laboral de marzo de 2017. De 193 encuestados, el 80% manifestó conocer poco o nada sobre TB. La mayoría identificó la tos como síntoma (74,6%) y refirió que es una enfermedad contagiosa (75,1%), transmitida por aire (61,7%) y curable (70,5%). No es tan frecuente la identificación de otros síntomas y hay concepciones erróneas sobre la transmisión. Identificar los conocimientos de la población acerca de la enfermedad permite orientar estrategias comunicativas y educativas para prevenir y controlar la TB, dirigidas al público que converge en el sistema de transporte masivo.