Investigou-se, soroepidemiologicamente, a leptospirose em 775 cães do município de Botucatu - SP, em amostras de sangue, obtidas durante a campanha anual de vacinação anti-rábica, coletadas de 14 postos de vacinação, distribuídos geograficamente, representando o total de 45 postos de cinco regiões do Município, com uma área territorial urbana de 31km². Do total de amostras, 449 eram de machos, e 326, de fêmeas; 564 eram de animais sem raça definida, e 211, puros. As idades variavam de três meses a 20 anos. Para o diagnóstico, foi realizada a soroaglutinação microscópica, utilizando-se 12 sorovares de Leptospira spp. A comparação entre o resultado do exame sorológico e as variáveis epidemiológicas foi realizada pelos testes de Goodman e do Qui-quadrado, coma= 0,05. Obtiveram-se 119 (15,3%) amostras positivas, com reação para 11 sorovares, com maior importância para o canicola, em 48 (40,3%) amostras, e pyrogenes, em 41 (34,5%). Pela análise estatística, encontrou-se diferença significativa em relação à raça - positividade em 17,7% dos animais sem raça definida e em 9,0% dos demais - e sexo - positividade em 18,4% de machos e 11,0% de fêmeas. Quanto à idade, não houve diferença significativa, com distribuição uniforme entre as faixas etárias estabelecidas.