Glukozidaz önce mısırdan üçlü-faz ayırma (TPP) tekniği ile saflaştırıldı ve ardından karakterize edildi. Üç faz elde etmek için amonyum sülfat ve t-butanol kullanıldı. Mısır α-glukozidazının yüksek saflaştırma katı ve aktivite geri kazanımı ile etkin bir şekilde saflaştırılması için çeşitli proses parametrelerinin örneğin; amonyum sülfat konsantrasyonu, enzim: t-butanol oranı ve pH etkisi çalışıldı. TPP sisteminin optimum saflaştırma koşulları %50(w/v) amonyum sülfat saturasyonu, 1.0:0.75 (v/v) ham ekstrakt:t-butanol oranı ve pH 4.5 olarak belirlendi. Optimize koşullar altında α-glukozidaz %60 aktivite verimi ile 3.8 kat saflaştırıldı. α-Glukozidazın molekül kütlesi sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) ile yaklaşık 29 kDa olarak belirlendi. Karakterizasyon çalışmaları, enzimin optimum pH ve sıcaklığının pH 4.5 ve 55°C olduğunu gösterdi. Saflaştırılan enzimin 25-60°C sıcaklık aralığında ve pH 3.5-5.5 aralığında oldukça kararlı olduğu bulundu. Kinetik sabitler (K M ve V max ) Lineweaver-Burk diyagramından 0.64 mM ve 0.45 U olarak hesaplandı. α-Glukozidaz aktivitesi 10 mM CaCl2 konsantrasyonunda oldukça arttı (%130). TPP α-glukozidazın uygulamaları için konsantre edilmesi ve saflaştırılması için kullanışlı bir stratejidir. Anahtar KelimelerÜçlü-faz ayırma (TPP), α-glukozidaz, mısır, saflaştırma.