The present work describes the development of a new high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of Cefixime trihydrate under different stress conditons as specified by ICH. For the analysis, a Phenomenex (250 x 4.6 mm, 5 µm particle size) ODS column and a SPD 20 A UV detector at 289 nm was used. The selected mobile phase was 10 mM disodium hydrogen phosphate (with 0.5% TEA, pH adjusted to 6.3 with OPA) and methanol in the ratio of 75:25 (v/v) in isocratic mode at a flow rate of 1 mL.min -1 .The linear regression analysis data for the calibration plots showed good linear relationship with r 2 = 0.9997 in the concentration range of 5-100 μg.mL -1 . The stress degradation was performed using acid, alkali, water, hydrogen peroxide and uv light. O presente trabalho descreve o desenvolvimento de um novo alta performance cromatografia líquida (HPLC) método para a determinação de cefixima tri-estresse sob diferentes condições, conforme especificado pelo ICH. Para a análise, a Phenomenex (250 x 4,6 mm, 5 µm de granulometria) ODS coluna e a SPD 20 um detector de UV em 289 nm foi utilizado. A fase móvel selecionado foi de 10 mM hidrogenofosfato dissódico (com 0,5% TEA, o pH ajustado para 6,3 com OPA) e de metanol em razão de 75:25 (v/v) no modo isocrático com uma taxa de fluxo de 1 mL.min -1 . A análise de regressão linear para dados da calibração parcelas apresentaram boa relação linear com r 2 = 0,9997 no intervalo de concentração de cerca de 5 100 µg.mL -1 . Degradação do estresse foi realizado utilizando um ácido, alcalino, a água, o peróxido de hidrogênio e luz uv.Unitermos: Cromatografia líquida de alto desempenho/análise quantitativa. Degradação. Indicador de estabilidade. Cefixima triidratada/determinação.