O objetivo deste estudo foi avaliar o tempo de exposição ao diquat no controle de Egeria najas, Egeria densa (Planchon) e Hydrilla verticillata (L.F.) Royle e utilização de nova tabela de avaliação para análise de eficácia em plantas aquáticas submersas. Para tanto, foram utilizadas as concentrações 0,2; 0,8 e 1,6 mg L-1 de diquat e um controle (sem aplicação do herbicida). Os fragmentos apicais de 10 cm permaneceram expostos por 5, 15, 30, 60, 240, 480, 720 e 1440 minutos. Em seguida, foram transferidos para recipientes plásticos com 1,0 L de água com 200 g de areia por 56 dias. A eficácia foi avaliada por sinais de toxicidade em 7, 15, 21, 28, 35, 42, 49 e 56 dias após aplicação (DAA), em nova tabela de avaliação para plantas aquáticas submersas. A E. densa apresentou maior sensibilidade ao diquat com 100% de controle nas três concentrações, sendo em 0,2 mg L-1 a partir de 240 minutos e em 0,8 e 1,6 mg L-1, em todos os tempos de exposição. Para H. verticillata ocorreu 100% de controle nas três concentrações, sendo 0,2 mg L-1 com 720 e 1440 minutos em 49 e 56 DAA, em 0,8 mg L-1 ocorreu 100% de controle a partir de 240 minutos e em 1,6 mg L-1 a partir de 30 minutos. Para E. najas ocorreu 100% de controle em 0,8 mg L-1 e 240 minutos e em 1,6 mg L-1 em 15, 480 e 1440 minutos, em 56 DAA. O tempo de exposição 240 minutos e a concentração 0,8 mg L-1 do diquat apresentaram excelente controle das três plantas aquáticas submersas. A tabela de sinais de toxicidade desenvolvida para avaliação de controle foi fundamental para a padronização dos resultados obtidos.