No abstract

Модернизирована ранее разработанная элективно-дифференциальная среда для культивирования V. cholerae. Показано, что модернизированная среда (СЭДХ-М) обладает необходимой чувствительностью и показателем прорастания. Рост на ней E. coli ингибировался полностью, а P. vul ga ris-в значительной степени. Среда имеет выраженные дифференцирующие свойства: оранжевые колонии холерного вибриона четко отличаются от колоний сопутствующей микрофлоры. В лабораторных испытаниях среда СЭДХ-М продемонстрировала некоторые преимущества перед референс средой TCBS при выделении V. cholerae из контаминированных фекалий. Ключевые слова: холера, элективные питательные среды, элективная среда для выделения холерного вибриона-СЭДХ-М, лабораторные испытания.

36Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections] в качестве ключевых регуляторов генов в бак-териальных клетках традиционно рассматривают белки, но не так давно были обнаружены системы контроля экспрессии генов с помощью малых рнк. первые гены не кодирующих малых рнк (smallRNAs (sRNAs), non-codingRNAs (ncRNA)) с неизвест-ными на тот момент функциями были обнаружены в бактериальных плазмидах более 30 лет назад [18,19, 24]. в последние годы в зарубежной литературе наблюдается лавинообразный рост числа публика-ций по малым рнк. как закономерный итог, на се-годняшний день известны сотни бактериальных ма-лых рнк, различающихся по структуре, механизмам действия и функциям. общее количество известных малых рнк у наиболее изученной по этим молекулам бактерии -Salmonella около 100, у E. coli приближа-ется к этому количеству. заявлено об обнаружении более 600 малых рнк у V. cholerae при использова-нии метода секвенирования последнего поколения (NGS) [7], что является рекордом среди всех бакте-рий с охарактеризованным малым рнкомом.разнообразие малых рнк породило необходи-мость выделения этой группы молекул в отдельный класс регуляторов. в настоящее время все малые рнк бактерий с регуляторными функциями харак-теризуют как гетерогенную совокупность высоко-структурированных рнк, которые обычно не транс-лируются в белки (некоторые, редко -в короткие пептиды), варьируют по длине от 50 до 400 (иногда несколько больше) нуклеотидов [1,15,16,19].большую группу малых рнк составляют малые регуляторные рнк, функционирующие по механиз-му комплементарного спаривания (гибридизации, т.е. образования водородных связей по типу «цепь нуклеиновых кислот (нк) -комплементарная ей нк цепь») оснований малой регуляторной рнк с ма- в настоящее время малые рнк бактерий с регуляторными функциями характеризуют как гетерогенную со-вокупность высокоструктурированных одноцепочечных рнк, обычно не транслирующихся в белки. большую группу малых рнк составляют малые регуляторные рнк, функционирующие по механизму комплементарного взаимодействия оснований малой регуляторной рнк с матричными рнк бактерий. в обзоре приведено описание механизмов непосредственного участия малых рнк в реализации патогенных свойств, формировании биопленки и регуляции вирулентности штаммов V. cholerae. в частности, описаны Hfq-зависимые малые рнк, управляю-щие экспрессией генов, ответственных за вирулентность и формирование биопленки V. choleraе; представлено влияние малых рнк на систему секреции шестого типа; показано формирование везикул холерного вибриона, управляемого малой рнк, имеющих важное значение для колонизирующей способности холерных вибрионов. приводится описание такого способа регуляции на уровне рнк, как «рибосвитчи» (рнк-переключатели).Ключевые слова: малые рнк, регуляция генов, Vibrio choleraе, рибосвитч.Корреспондирующий автор: Писанов Руслан Вячеславович, e-mail: pisanov_rv@antiplague.ru. R.V.Pisanov, A.S.Vodop'yanov, D.I.Simakova the Role of small RnAs in Controlling expression of Genes Involved in the Implementation of Vibrio c...

The review reports on the secretion pathways of the main virulence factor of Vibrio cholerae, cholera toxin, both through the two-stage Sec-dependent type 2 secretion system and with the help of vesicles of the outer membrane of V. cholerae. The ways of toxin transfer into the host organism, depending on its form, are discussed. The well-studied free soluble cholera toxin is secreted extracellularly and transmitted in a GM1-dependent manner through cholesterolrich lipid rafts. The transfer of cholera toxin associated with vesicles has advantages over free toxin, because substances inside the outer membrane vesicles are protected from external proteases and host antibodies by the membrane that forms the vesicle. Vesicular transporting of cholera toxin into the target cell occurs via clathrin-dependent, caveolin-dependent and lipid raft-dependent endocytosis. The specific transport route is determined by the structure of the vesicles. Clathrindependent endocytosis is described for V. cholerae strains cultivated at low osmolarity of the medium, whose outer membrane vesicles contain the cholera toxin subunit A inside. Lipid raft-dependent endocytosis is characteristic of vesicles in which cholera toxin is located on the surface. In addition, endocytosis of V. cholerae outer membrane vesicles through structures known as caveolae is presented.

удк 616.932:616-07 л.В. ларионова, д.и. симакова, а.н. наркевич, и.В. архангельская, Г.Г. Шубин КонСтруирование диагноСтиКума Полимерного холерного антигенного на оСнове лиПоПолиСахарида Vibrio cholerae о1 СерогруППЫ ФКУЗ «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт», Ростов-на-Дону, Российская Федерация представители рода Vibrio choleraе отличаются структурой липополисахарида, в частности его о-полисахаридных цепей (о-антиген), определяющей серологическую специфичность вибрионов. в настоящее время для получения препарата липополисахарида используется водно-фенольный метод. однако данная методика относится к жестким химическим методам, приводит к изменению исходной молекулярной организации биополимера, нарушая его структуру и биологические свойства. современные технологии при разработке диагностических препаратов для иммуносуспензионной реакции агломерации объемной позволяют получать синтетические носители с различными реакционными группами на поверхности частиц, способными связывать антигены/антитела. цель исследования -создание холерного антигенного диагностикума на основе липополисахарида Vibrio cholerae о1 серогруппы. материалы и методы. в качестве сенситина использован липополисахарид, полученный с помощью авторской модификации метода ферментативной очистки из клеточных оболочек холерного вибриона с использованием ультразвуковой дезинтеграции. результаты и обсуждение. полученный сенситин содержит небольшие примеси белка (1,5 %) и нуклеиновых кислот (0,1 %). диагностический препарат характеризуется высокой аналитической чувствительностью в реакции агломерации объемной с холерными коммерческими и экспериментальными кроличьими сыворотками к Vibrio cholerae о1 серогруппы (1:640 -1:5120) и аналитической специфичностью (диагностикум не взаимодействует с гетерологичными сыворотками, с сыворотками к возбудителям острых кишечных инфекций, а также с сыворотками здоровых доноров). сконструирован диагностикум полимерный холерный антигенный, предназначенный для выявления антител к холерному липополисахариду в сыворотках крови больных, переболевших, подозрительных на заболевание или вакцинированных людей.Ключевые слова: Vibrio cholerae, липополисахарид, полимерные микросферы, диагностикум, аналитическая чувствительность, аналитическая специфичность. Корреспондирующий автор: Ларионова Людмила Владимировна, e-mail: plague@aaanet.ru. Для цитирования: Ларионова Л.В., Симакова Д.И., Наркевич А.Н., Архангельская И.В., Шубин Г.Г. Конструирование диагностикума полимерного холерного антигенного на основе липополисахарида Vibrio cholerae О1 серогруппы. Проблемы особо опасных инфекций. 2019; 4:67-72.Abstract. Representatives of the genus Vibrio cholerae differ in the structure of lipopolysaccharide, in particular, its O-polysaccharide chains (O-antigen), which determines the serological specificity of vibrios. Currently, the waterphenolic method is used to obtain the lipopolysaccharide preparation. However, this technique relates to harsh chemical methods, leads to a change in original molecular organizatio...