The work demonstrates the possibility of using electron impact mass spectrometry (EI) on a MB-80A device ("Hitachi", Japan) with a double electron focusing for analysis of [ 2 H, 13 C]amino acid mixtures of L-phenylalanine producing strain of Brevibacterium methylicum and L-leucine-producing strain of Methylobacillus flagellatum, and [ 2 H, 13 C]amino acids of the total biomass protein isolated while growing the bacterial cells on media containing as a source of stable isotopes [ 2 H]methanol, [ 13 C] methanol and 2 H 2 O. For mass-spectrometric analysis of the level of incorporation of stable isotopes 2 H and 13 C into the molecules of [ 2 H, 13 C]amino acids the multi-componential mixtures of [ 2 H, 13 C]amino acids, derived from cultural media and protein hydrolysates after hydrolysis in 6 M 2 HСl (3 % phenol) and 2 M Ва(OH) 2 were modified into N-benzyloxycarbonyl-derivatives of [ 2 H, 13 C]amino acids as well as into the methyl esters of N-dansyl-derivatives of [ 2 H, 13 C]amino acids, which were separated by the method of reverse phase high performance liquid chromatography (RP HPLC) on a column with octadecylsilane gel Separon SGX C18. The levels of 2 H and 13 С enrichment of secreted amino acids and amino acid residues of protein were found to be varied depending on the metabolic pathways of biosynthesis and concentration of 2 Hand 13 C-labelled substrates in growth media from 20.0 atom. % to L-leucine/isoleucine up to 97.5 atom. % for L-alanine.
Рассмотрены основные тенденции развития проточных методов анализа как в плане общих схемных решений, так и круга решаемых аналитических задач. Обсуждаются принципы, возможности и ограничения известных методов проточного анализа, их роль в реализации концепции зеленой аналитической химии. Наряду с новыми общими схемами проточного анализа рассматриваются вариации его гибридизации со сложными методами многокомпонентного анализа-спектральными и хроматографическими. Особое внимание уделяется стадии пробоподготовки, включающей методы разделения и концентрирования. Приведены примеры применения проточных методов для автоматизации методик анализа off-line и создания автоматизированных систем аналитического контроля on-line. Среди областей практического применения проточных методов основное внимание уделено анализу объектов окружающей среды, фармацевтике и радиохимическому анализу.
Направленная клеточная миграция играет важную роль в физиологических процессах, например таких как защита организма от инфекций и вирусов, заживление ран, метастазирования рака и др. Клеточная миграция зависит в том числе и от воздействия на клетки градиентов концентраций химических веществ. Не так давно микрофлюидные устройства начали применяться для изучения миграции клеток. Подобные устройства по-зволяют прецизионно конфигурировать и управлять градиентами химических веществ, открывая новые воз-можности при изучении сложных механизмов взаимодействия клеток как внутри популяции, так и с окру-жающей средой. Обзор посвящен достижениям, связанным с разработкой микрофлюидных устройств для изучения влияния градиентов химических веществ на клеточную миграцию, классификации данных устройств, а также сравнению их с "традиционными" подходами, применяемыми в клеточной биологии для решения аналогичных задач. Кл. сл.: микрофлюидное устройство, клеточная миграция, градиент химического вещества ВВЕДЕНИЕКлеточная миграция является высокоупорядо-ченным процессом, происходящим при различных взаимодействиях, которые могут иметь место ме-жду клетками, тканью и окружающей их средой [1, 2]. Подобные взаимодействия играют важную роль в различных биологических процессах вклю-чая иммунный ответ на воспалительные процессы и заживление ран [3][4][5][6]. Биологические механизмы направленной клеточной миграции являются сложными и зависят от режима движения клеток и их типа [1, 7]. Например, бактериальные клетки плывут сквозь жидкую среду в поисках питатель-ных веществ при помощи вращения тонкого жгу-тика без необходимости прикрепления к подлож-ке, а их направление и подвижность напрямую зависят от локальных условий [8]. С другой сторо-ны, многие типы клеток млекопитающих мигри-руют сквозь твердую внеклеточную матрицу при помощи циклических процессов сложной переда-чи сигналов, реорганизации цитоскелета и взаи-модействия клеток с данной матрицей [9].Градиенты концентрации химических веществ относятся к факторам окружающей среды, влияющим на миграцию различных типов клеток. Данный фактор делят на две условные группы: хемотаксис -направленная миграция клеток при воздействии градиентов, созданных при растворе-нии веществ (хемоаттрактанта); гаптотаксис -направленная клеточная миграции при создании градиентов веществ на поверхности (хемоаттрак-тант связан с твердой фазой). Например, белые кровяные тельца, такие как нейтрофилы и лимфо-циты, следуют за градиентами хемоаттрактантов управляемых / вырабатываемых тканью для вы-полнения ими иммунных функций [10]. Непра-вильно направленные белые кровяные тельца могут быть причиной различных заболеваний и расстройств, например хронической обструк-тивной болезни легких, воспаления кишечника и рассеянного склероза [10, 11]. Другим примером является миграция раковых клеток в направлении градиентов выделяемых тканями хемоаттрактан-тов (эпидермальный фактор роста и т. д.), приво-дящая к образованию метастазов [12][13][14]. Приме-ром также может служить миграция эпителиаль-ных клеток при заживлении ран и мигр...
Measurements of energy transformation and dissipation in mitochondria by the calorimetric method were carried out in the second half of the last century. However, to date no specialized calorimeter has been developed for this purpose. Selection of compounds providing uncoupleted mitochondrial respiration without damaging the respiratory chain components, for use in pharmaceutical compositions of drugs, development of new neuroprotectors, nefroprotectors require precise measurements of heat release by different mitochondrial uncouplers of oxidative phosphorylation. A capillary differential nanocalorimeter for studying energy transformation and dissipation in the mitochondria has been created in the IBI RAS. The instrument meets the above requirements. The principal advantage of the nanocalorimeter is that it has thermal bridges for the thermostatingthe mitochondria injection. In the thermal bridges mitochondria acquire the desired temperature for a few seconds. Mitochondria are introduced uniformly along the entire length of the calorimeter chamber by means of a dispensing needle. This provides mixing of mitochondria with the sample without great energy consumption and thermal noise. Precision measurements of thermal power of the processes of transformation and dissipation of energy in the mitochondria are carried out at an absolute error less than 50 nW.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
customersupport@researchsolutions.com
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
This site is protected by reCAPTCHA and the Google Privacy Policy and Terms of Service apply.
Copyright © 2025 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.