O presente estudo foi delineado com o objetivo de verificar a necessidade de inativar o leite em pó desnatado reconstituído, bem como o uso do leite desnatado UHT como diluente de sêmen eqüino resfriado. Para tanto, foram efetuados dois experimentos. No primeiro experimento, 4 diluentes foram testados: leite desnatado não inativado, leite desnatado inativado, leite desnatado UHT, marca A e leite desnatado UHT marca B. 20 coletas de sêmen foram realizadas. O sêmen resfriado a +4°C foi avaliado quanto à motilidade progressiva e motilidade total nas 0 , 24 e 48 horas posteriores à diluição. No segundo experimento, um total de 101 ciclos foram utilizados, inseminando-se as éguas com sêmen diluído em leite desnatado não inativado e leite desnatado inativado. A diluição foi realizada numa proporção de 1:2 (sêmen: diluente) e a dose inseminante mínima utilizada foi de 500x10(6) espermatozóides. Conclui-se que não há necessidade de inativar o leite em pó desnatado, reconstituído, na sua utilização como diluente de sêmen eqüino resfriado, e que o leite desnatado UHT pode ser utilizado como diluente para preservar sêmen eqüino resfriado.