Alterações bioquímicas podem ser usadas como biomarcadores. Entretanto, medições bioquímicas são afetadas não só por poluição e podem ser espécie-específicas. Assim, já que nosso objetivo foi buscar alterações de atividades enzimáticas causadas por agrotóxicos no peixe dourado, Salminus brasiliensis, precisamos primeiramente estabelecer atividades enzimáticas basais, no inverno e no verão. Depois, exemplares de dourado foram expostos a agrotóxicos. Um inseticida com o princípio ativo triflumurom foi testado a 0,1 ppm na água. Em outro experimento um herbicida com glifosato foi acrescentado na água para 1,5 ppm. Foram testados tempos de exposição de 4 e 24 horas. Um grupo controle foi mantido sem nenhuma exposição. Duas atividades com substratos específicos para isoenzimas do P-450 foram ensaiadas por fluorescência nos microssomos hepáticos. Uma foi com o substrato 7-etoxicumarina (ECOD) e outro com a 7-etoxirresorufina (EROD). O ensaio da ECOD apresentou valores pelo menos dez vezes maiores do que o da EROD. A atividade da ECOD teve uma elevação no inverno quando comparada ao verão. A atividade da carboxilesterase (CaE) foi ensaiada no soro e na fração dos microssomos do fígado utilizando como substrato o 4nitrofenilacetato pelo aparecimento do para-nitrofenol durante um minuto no meio reacional. A atividade de CaE nos microssomos do fígado dos dourados foi 0,22 ± 0,07 µmol.min -1 .mg -1 . A atividade de CaE no soro atingiu valores de 6,96 ± 3,71 µmol.min -1 .mL -1 . Não foi verificada diferença sazonal nos níveis da CaE. Dourados expostos ao triflumurom ou ao glifosato tiveram níveis estatisticamente mais elevados de CaE no soro. Não foi verificada diferença significativa na atividade de CaE e de P-450 na fração dos microssomos do fígado comparando o grupo controle com os expostos. As atividades da CaE nos microssomos do fígado e no soro são claramente detectáveis, sendo que o método com uso de soro é vantajoso por ser rápido e por preservar a vida do animal. As atividades enzimáticas hepáticas ensaiadas no verão foram diferentes das do inverno. Assim, não se deve ensaiar atividades de mono-oxigenases e esterases do fígado do dourado como biomarcadoras sem atentar para o nível basal da estação do ano em que se processarem os bioensaios.