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Los selladores endodóncicos pueden causar citotoxicidad en los tejidos periapicales después de un tratamiento de conductos. En general, las pruebas de biocompatibilidad in vitro realizadas a los selladores evalúan su citotoxicidad cuando éstos ya endurecieron, lo que limita la evaluación de sus efectos durante la aplicación aguda; condición observada en la clínica. En el presente trabajo se evaluó la citotoxicidad de tres selladores: AH-Plus™, RoekoSealAutomix® (RSA) y Roth Root utilizando un dispositivo que permite evaluar los efectos de los selladores durante su fase de polimerización. Cultivos de fibroblastos murinos fueron expuestos a los distintos selladores durante 6, 12, 24, 36, 48 y 72 horas. Después de cada periodo de tiempo se evaluó la morfología celular por microscopia de luz y la viabilidad mediante la prueba de exclusión del azul tripano. La morfología de fibroblastos expuestos al RSA no se altera. Sin embargo, al exponerlos a los otros dos selladores la mayor parte de los fibroblastos se despegan después de las primeras 6 horas. El ensayo de viabilidad muestra que el número de fibroblastos fue muy parecido entre el grupo control y el grupo expuesto a RSA a lo largo del curso temporal. En contraste, la muerte de fibroblastos es evidente desde las primeras 6 horas de exposición al AH-Plus™ y al Roth Root. En conclusión, debido a que el RSA no mostró citotoxicidad, parece que los selladores con base de silicona constituyen la primera elección para el tratamiento de conductos.