To investigate the decrease of transcription and to determine the localization of RNA molecules during spermiogenesis in the fern Scolopendrium, we have used the enzyme-gold electron microscope method. During cell differentiation, the labeling decreases over the cytoplasm and increases over the nucleus. In the latter, the nucleolus disappears at the beginning of differentiation and the gold particles that were at first situated over the dispersed chromatin are then located over the condensed chromatin. In mature gametes, gold particles linked to RNA are abundant over the dense and homogeneous nucleus and sparse over the cytoplasm. By using in situ hybridization of RNA-poly(A) tails with radioactive poly(U) probes, we have shown that these RNA molecules are mRNA; they are located in the condensed chromatin of the mature sperm nucleus.
Laboratoire de Biolosïe de la reproduction de• tJésitoru. Uniwr.ité Pierre et Marie Curie. 4. Plooe Juaaieu.. F-75252 Paria Cedex OS Raauné.-Lu donn6ea rbntea aur la morphologie et la morphogenàe du cytoaquelette dana ln gamtt .. mobilel dn rig6taux aont présent6es.Su.mmory.· The present state of knowledge about morphology and morphogeneala of cytoskeleton ln plant motDe gametel la drawn up.La reproduction sexuée implique le rapprochement puis l'union de deux cellules haploïdes, les gamètes. Chez de très nombreux végétaux (Algues, Champignons inférieurs, Bryophytes, Ptéridophytes et certaines Gymnospermes) ce rapprochement de cellules, produites par des organismes différents, est actif, c'est-à-dire que l'une des cellules appelées à fusionner {parfois les deux) est libérée dana le milieu extérieur où eUe se déplace par elle~même.Ce mode de fécondation, la zoïdogamie, est considéré comme primitif car, pendant la période du transfert, le matériel génétique transporté par la (ou les) cellule est exposé aux agressions du milieu extérieur. Les gamètes mobiles, qui le plus souvent sont les gamètes mâles ou spermatozoïdes, sont des cellules extrêmement spécialisées ct cette spécialisation s'accompagne le plus souvent d'une différenciation morphologique, parfois très importante, dans laquelle les éléments constituant le cytosquelette sont très largement impliqués.
Résumé.-La gamétogenèse mâle du Phyflitis sco/opendrium est marquée par la condensation progressive et totale de la chromatine, la disparition du nucléole et l'enroulement hélico1dal du noyau. La technique de cytochimie, utilisant la ribonucléase complexée à l'or collo1dal, montre que des AAN persistent sous lorme dispersée dans le noyau durant toute la spermiogenèse et sont étroitement associés à la chromatine du noyau condensé du gamète mOr. L'emploi de méthodes de biologie moléculaire révèle qu'il est possible d'hybrider in situ, sur coupes, une sonde radioactive 'H-poly U au niveau des noyaux hélicoYdaux des gamètes mOrs ; la seule séquence susceptible de participer à cette hybridation est la "queue• polyA des AANm. Ceuxci sont donc présents dans le gamète mOr ; ce sont des AANm longue vie ; ils permettent le transfert de l'information patemelle au zygote avant que la condensation de la chromatine mâle autorise les transcriptions.Summary.-The male gametogenesis of Phyllitis scolopendrium is characterized by the progressive and complete condensation of the chromatin, the disappearance of the nucleolus and the coiling of the nucleus. The ANasa-gold cytochamistry mathod shows thal disparsad ANAs parsis! in the nucleus, ail along spermiogenesis, and are strictly associatad with the chromatin in the condensed sperm nucleus. The in situ hybridization, on section, wlth 'H-poly U probe shows a labelling over the coilad sperm nucleus. The only sequences which are able to interact specifically with poly (U) probe ara the poly (A) !ails of the mANAs. The presence of mANAs in a condensed sperm nucleus is unusual : they are mANAs long lifa. They could allow expression of the mala genome ln the firsl stages of embryo development, whareas the male DNA, remaining in the condensed lerm, ls not yet transcribed.
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