The neck domain of fungal conventional kinesins displays characteristic properties which are re¯ected in a speci®c sequence pattern. The exchange of the strictly conserved Tyr 362, not present in animals, into Lys, Cys or Phe leads to a failure to dimerize. The destabilizing effect is con®rmed by a lower coiled-coil propensity of mutant peptides. Whereas the Phe substitution has only a structural effect, the Lys and Cys replacements lead to dramatic kinetic changes. The steady state ATPase is 4-to 7-fold accelerated, which may be due to a faster microtubule-stimulated ADP release rate. These data suggest that an inhibitory effect of the fungal neck domain on the motor core is mediated by direct interaction of the aromatic ring of Tyr 362 with the head, whereas the OH group is essential for dimerization. This is the ®rst demonstration of a direct in¯uence of the kinesin neck region in regulation of the catalytic activity.
The selection of suitable parts of a gene as antisense RNA sequences is largely a matter of trial and error and, as a consequence, a rather time-consuming process. In this study, we present a rapid and reproducible method to bypass this protracted procedure by using a chimeric enhanced green fluorescent protein (EGFP)-antisense RNA-producing vector. The combination of a reporter gene and antisense RNA allows easy measurement by flow cytometry of antisense RNA efficacy in successfully transfected cells shortly after transfection. Four chimeric EGFP-p185c-erbB-2-antisense RNA vectors were constructed and transfected into the p185-c-erbB-2-overexpressing cell line SKBR3. Within 1 week, we were able to estimate the inhibitory capacities of the different antisense RNA sequences used in this study. Our results strongly suggest that a chimeric EGFP-antisense RNA vector is an appropriate tool to expedite the laboratory work and time in screening the efficacy of antisense RNA strategies.
Art. 5 III VerbrKaufRL und § 476 BGB haben damit eine zusätzliche Funktion: Bei sich entwickelnden oder "weiterfressenden" Mängeln kann die Vermutung die Klärung der genauen Ursache der Vertragswidrigkeit entbehrlich machen, wenn sie nur auf einer Entwicklungsstufe vom Verkäufer nicht widerlegt werden kann. 13 Das bedeutet für den Käufer nicht nur hinsichtlich des Zeitpunkts eine erhebliche Erleichterung und verlangt vom Gericht, daß es den Gegenbeweis für jede Stufe der Entwicklung einfordert. Diese für den Verkäufer ungünstige Konsequenz entspricht auch dem Zweck von Art. 5 III VerbrKaufRL: Gerade die Unsicherheit über die genaue Quelle der später auftretenden Vertragswidrigkeit würde nach den allgemeinen Regeln zu Lasten des Käufers gehen und erleichtert so dem Verkäufer, die Feststellung der Vertragswidrigkeit durch Vorbringen von Alternativursachen zu vereiteln. Soll ihm dieses Instrument genommen werden, bleibt nur, ihm das Risiko der fehlenden Feststellbarkeit der jeweiligen Ursachen aufzuerlegen.Genau dies hat der Senat vorliegend versäumt: Mit der Lockerung des Zahnriemens gibt es nämlich eine Stufe der Entwicklung der Vertragswidrigkeit, für welche die Vermutung nach Art. 5 III VerbrKaufRL und § 476 BGB nicht widerlegt ist. Damit kommt es auf weitere Feststellungen zur Ursache dieser Lockerung aber gerade nicht mehr an.
EXHIBITIONISM: A SYMPOSIUM ON QUEER CURATORIAL PRACTICES Organized by John David Rhodes and Pawel Leszkowicz. Sponsored by the Centre for Visual Fields and the Centre for the Study of Sexual Dissidence and Cultural Change at the University of Sussex, and the Royal Pavilion & Museums,
Brighton & Hove. Held at the Old Courthouse, Brighton, UK, 16 November 2011.
BEYOND THE WHITE CUBE? AUSSTELLUNGS ARCHITEKTUR, RAUMGESTALTUNG UND INSZENIERUNG HEUTE Symposium organized by Diana Brinkmeyer, Anke Kugelmann, Christina Landbrecht and Philip Norten, Berlinische Galerie, Landesmuseum
fr Moderne Kunst, Fotografie und Architektur, Berlin, 25 March 2011
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