Summary Investigations concerning the proof of BHV1 infection by an intradermal test II. Experiments A purified concentrated BHV1 antigen that had been tested in field trials was also tested under isolated conditions in BHV1 positive and negative cattle. The antigen proved to act specifically even after storage for 2 years at + 4 °C or for 6 months at 37 °C. The best results were obtained when the test was read 48–72 hours after the injection, which is in agreement with the field trials. The increase in skin thickness decreased unless boostered by infection or vaccination gradually. The test is unsuitable to control a vaccination programme. There was no correlation between the increase in thickness and humoral antibody titers. Repeated application of the intradermal injection of the antigen did not result in seroconversion in seronegative cattle. The biological limits of the test evaluation are discussed. Zusammenfassung Ein in Praxisversuchen bereits erprobtes, konzentriertes und gereinigtes BHV 1‐Intrakutantest‐antigen wurde in Experimenten unter isolierter Haltung an BHV 1‐seropositiven und ‐seronegativen Rindern geprüft. Die Untersuchungen ergaben Spezifität, mindestens 2jährige Haltbarkeit und über 6 Monate Thermostabilität bei bis zu 37 °C. In Übereinstimmung mit den Ergebnissen vorangegangener Feldversuche war der beste Kontrollzeitpunkt der Hautdickenzunahme am 2. und 3. Tag nach Testansatz. Die Hautdickenzunahme von BHV 1‐infizierten Rindern nahm ohne deren Boostermöglichkeit in zahlreichen Einzelfällen mit zunehmendem Abstand vom Infektionstermin ab. Zur Kontrolle eines BHV 1‐Impferfolges war der Intrakutantest nicht geeignet. Eine Korrelation zwischen Stärke der Hautdickenzunahme und Höhe der Antikörpertiter beim Einzeltier wurde nicht beobachtet. Eine wiederholte Anwendung des Intrakutantestes bei BHV 1‐negativen Rindern führte nicht zur Stimulation zellvermittelter oder humoraler Antikörper. Die biologisch bedingten Grenzen der Testbewertung werden diskutiert.

Studies on an intradermal test for the diagnosis of BHVl infectionAn intradermal test (delayed hypersensitivity test) for the diagnosis of BHVl infection was evaluated in 791 cattle of 16 dairy farms. The skin reactions were compared with the results of serological examinations using a commercial BHVl ELISA kit (Trachitest).As antigen concentrated, purified and inactivated BHVl was used. The skin reaction (increase of the skin fold thickness) was used for the interpretation of test results.The best results were obtained with the control of the skin reaction on the third day after injection of the antigen.From 393 serologically BHVl negative cattle with an age of more than 6 months 391 (99.5 Yo) had a skin reaction up to 1.0mm and 2 animals (0.5 %) had a reaction of 1.3 and 1.9mm, respectively.The mean increase of skin fold thickness was 0.2 mm.Out of 291 serologically BHVl positive cattle with an age of more than 6 months 270 had antibodies from natural infection and, partially, from additional vaccination with inactivated BHVl vaccine. 266 (98.5 %) of these animals showed a skin reaction of more than 2.0 mm, in 3 animals (1.1 Yo) a skin reaction up to 1.0 mm was observed and 1 animal (0.4 %) had a reaction of 2.0mm. The mean increase of the skin fold thickness was 6.3 mm. 21 animals had BHVl antibodies only because of vaccination with inactivated BHVl vaccine. Only 4 animals had a skin reaction of more than 2.0 mm.Among 107 animals with an age up to 6 months 30 were serologically BHVl positive and 77 were BHVl negative. In all animals the skin reaction was less than l.Omm, the mean was 0.2mm. EinleitungFur den Nachweis des bovinen Herpesvirus Typ 1 (BHV 1; IBWIPV-Virus) stehen heute zuverlissige labordiagnostische Verfahren zur Verfugung. Z u m direkten Virusnachweis werden die Virusisolierung aus Sekreten, Exkreten und Organen infizierter Tiere unter Verwendung von Zellkulturen oder die Immunfluoreszenztechnik an Organmaterial angewandt.

Zusammenfassung Mit Parainfluenza‐3‐Virus wurden über 150 Passagen und mit Virusdiarrhoe‐Virus über 140 Passagen in Kälbernierenkulturen durchgeführt. Durch diese Dauerpassagen konnten beide Virusstämme soweit attenuiert werden, daß sie nach subkutaner Applikation bei 8–14 Tage alten, gesunden Kälbern keine klinischen Krankheitssymptome mehr auslösten. In Instituts‐ und Feldversuchen wurde eine Kombinationsvakzine, bestehend aus einem vermehrungsfähigen, attenuierten PI‐3‐Virus und MD‐VD‐Virus und aus abgetöteten Pasteurella haemolytica‐Keimen sowie eine monovalente MD‐VD‐Lebendvakzine auf Unschädlichkeit und Wirksamkeit geprüft. Die Vakzinen sind gleichermaßen geeignet zur Immunisierung von Kälbern bzw. Jungrindern und zur Verhütung von Neuerkrankungen bei Mucosal Disease‐Ausbrüchen. Der Impferfolg ist abhängig vom Status der Kolostralimmunität und damit vom Alter der Tiere. Da bei jungen Kälbern mit dem Vorhandensein von passiv übertragenen, maternalen Antikörpern, welche die Wirksamkeit der Vakzine beeinflussen können, gerechnet werden muß, empfiehlt sich eine zweimalige Impfung im Abstand von 1–3 Monaten. Beide Vakzinen können auch ohne Gefahr als Notimpfung eingesetzt werden. Bei diagnostizierten Ausbrüchen von Mucosal Disease wird als Notimpfung der Einsatz der monovalenten, reinen Mucosal Disease Vakzine empfohlen. Summary Development and testing of a combined vaccine against para‐influenza 3, mucosal disease and Pasteurella haemolytica infection in cattle Para‐influenza 3 virus was taken through more than 150 passages and virus diarrhoea virus more than 140 passages in calf kidney cultures. In this way both virus strains were attenuated to such an extent that no clinical symptoms resulted from their subcutaneous inoculation into 8–14‐day‐old healthy calves. Laboratory and field studies were carried out on (a) a combined vaccine comprising living attenuated PI‐3 virus and MD‐VD virus, killed Pasteurella haemolytica, and (b) on a monovalent MD‐VD live vaccine, in respect of harmlessness and effectiveness. Both vaccines proved equally suitable for the immunisation of calves and young stock and for preventing new cases in outbreaks of mucosal disease. The effect depends on the status of the colostral immunity and is thus dependent on the age of the animals. Since young calves may possess passive maternal antibodies which can influence the effectiveness of the vaccine, it is advisable to give two injections at an interval of 1–3 months. Both vaccines can be used without ill effects as an emergency inoculation. In the presence of an outbreak of mucosal disease the monovalent pure mucosal disease vaccine is recommended as an emergency inoculation. Résumé Développement et expérimentation d'un vaccin combiné contre la parainfluenza‐3, la maladie des muqueuses et une infection à Pasteurella hemolytica chez le boeuf On procède à plus de 150 passages avec du virus parainfluenza‐3 et plus de 140 passages avec du virus de la virus‐diarrhea en cultures de reins de veaux. Par ces passages continus, on est parvenu à attén...