Um dos maiores problemas a ser resolvido em serviços de saúde é o fato de que muitos micro-organismospatogênicos podem crescer sobre superfícies sob o fenótipo de biofi lmes. Células microbianas crescidas sob ofenótipo de biofi lmes normalmente se encontram imobilizadas na matriz polimérica extracelular e apresentamforam desenvolvidas três formulações detergentes para uso em ambiente clínico-hospitalar-odontológico,contendo digluconato de clorexidina 2% em bases catiônica, aniônica e não iônica. Essas formulações foramtestadas quanto às suas capacidades de inativação de biofi lmes de Staphylococcus aureus ATCC®25933®, Pseudomonasaeruginosa ATCC®27853® e Candida albicans SC5314. Foi mensurada a ação detergente das três formulaçõessobre os biofi lmes de 24h das três entidades microbianas e foi empregado o ensaio de retenção de cristalvioleta 0,5%. De forma surpreendente, na formulação com base aniônica, deforma inversa ao esperado, aclorexidina comprometeu parcialmente a atividade inativante do detergente, talvez por precipitação do tensioativo.Os resultados mostraram que os componentes das formulações detergentes aqui testadas parecemser mais determinantes na inativação das células microbianas dos biofi lmes que a clorexidina.