ResumenExiste una amplia diversidad de métodos para inmovilizar enzimas y para seleccionar alguno de ellos debe considerarse la enzima en cuestión, así como las características del proceso y los recursos e infraestructura disponibles. En este trabajo se ensayó el método de atrapamiento en gel de alginato para inmovilizar la pectinasa, una enzima de gran utilidad en la industria de alimentos.Palabras Clave: pectinasa, alginato, gelificación, inmovilización, atrapamiento.a Alumno de la Licenciatura en Química en Alimentos. b Profesor Investigador del Área Académica de Química Autor de correspondencia. Correos electrónicos: avilescabralalimentos@gmail.com, javierdj03@gmail.com, luchouaeh@gmail.com, icelabeltran@gmail.com IntroducciónLas enzimas son catalizadores biológicos, de naturaleza proteica, altamente específicos. Su origen biológico es responsable de algunas de sus ventajas y limitaciones con respecto a los catalizadores químicos. Dos de las características que han limitado la aplicación de las enzimas en diversos procesos son: las condiciones de trabajo bajo las cuales son estables y su solubilidad en agua, esto último las hace difíciles de separar del medio para reutilizarlas. Con los métodos de inmovilización los problemas anteriores se han solventado en gran medida (Voet y Voet, 2006).La inmovilización enzimática se puede definir como el confinamiento de la enzima en un soporte, lo cual limita su movimiento, pero conserva su poder catalítico. La inmovilización además aumenta la estabilidad de la enzima y hace posible su reutilización al mantenerla en forma insoluble. No obstante, la inmovilización también presenta algunos inconvenientes como la alteración de la conformación de la enzima, pérdida de actividad, heterogeneidad en el sistema soporte-enzima (ya que habrá enzimas unidas al soporte en mayor o menor grado), y el incremento en el costo de la enzima inmovilizada (Arroyo, 1998).Existen diversos métodos para inmovilizar enzimas, los cuales se pueden dividir en dos categorías de acuerdo al tipo de unión que ocurre entre el soporte y la enzima: unión física y unión química. Dentro del primer grupo encontramos dos variantes: atrapamiento e inclusión en membranas, y entre los métodos que se basan en una unión química están la unión a soportes y el reticulado (Lupo y González, 2012). En la presente práctica empleamos un método de atrapamiento para inmovilizar la enzima pectinasa en un gel de alginato. Materiales y métodos Preparación de solucionesSe prepararon 25 ml de alginato de sodio al 2%, para lo cual se pesaron 0.5 g de alginato de sodio, se disolvieron en un poco de agua caliente y se aforó el volumen a 25 ml, usando también agua caliente (aproximadamente a 40°C). Para preparar la solución enzimática se pesaron 0.25 g de pectinasa (Sigma-Aldrich No. E.C. 3.2.1.15) que se disolvieron en aproximadamente 5 ml de agua y finalmente se aforaron a 25 ml. Finalmente, se preparó una solución de cloruro de calcio 0.3M, para lo cual se pesaron 2.5 g de cloruro de calcio, se disolvieron en aproximadam...
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