Ein pH-Stat wird mit einer Bürettenkombination versehen, mit der dem Bestimmungsansatz eine Substratlösung mit gleicher Geschwindigkeit zugeführt wird wie das zur Neutralisation benötigte Titrationsmittel. Bei gleichen molaren Konzentrationen von Substratlösung und Titrationsmittel wird dadurch die Substratkonzentration im Bestimmungsansatz konstant gehalten. Auch bei kleinen Substratkonzentrationen werden so für einige Minuten gerade Zeit-Umsatz-Kurven erhalten. Die Methode wird bei der Bestimmung der K m -Werte von Penicillinase und Lactatdehydrogenase erprobt.
An apparatus for maintaining the constancy of low substrate concentrations in kinetic measurements with a pH-statA pH-stat is equipped with a combination of burettes, arranged so that substrate solution and the titration reagent required for neutralisation, are added to the reaction mixture at the same rate. If the molar concentrations of the substrate solution and the titration reagent are the same, the substrate concentration in the reaction mixture remains constant. In this way, even for low substrate concentrations, rectilinear reaction-time curves are obtained over a few minutes. The method has been tested in the determination of the K m -values of penicillinase and lactate dehydrogenase.Reaktionen, bei denen Wasserstoffionen verbraucht oder freigesetzt werden, können mit der pH-Stat-Metbode verfolgt werden (1
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