Esta es una revisión general de los trabajos previos y subsecuentes al hallazgo del colorante de Giemsa, con énfasis en los azules de metileno policromos. Se presenta un breve bosquejo biográfico de Berthold Gustav Carl Giemsa, así como de la constitución y mecanismo de acción de su colorante y el resultado de análisis únicos por HPLC de su azur II (azul de metileno, 63,6%; azur B, 28,6%; azur A 4, 4%; azur C, 1,4%, y tionina, 1,9%). Por tanto, el azur I no era 'puro' sino una mezcla de tionina y todos sus derivados metilados en los grupos amina 3 y 7, muy probablemente preparada por oxidación del azul de metileno en medio ácido como lo definió Lillie. Se tabulan los usos del colorante de Giemsa informados durante los últimos 32 años.Palabras clave: Giemsa, azur, azul de metileno, azul policromo.
Giemsa stain: one hundred years of discoveryResearch work associated with the development of Giemsa stain is revied, with emphasis on the methylene blue polychromes. A short biographical sketch of Dr. Berthold Gustav Carl Giemsa is presented, alonf with the composition of his original formulation and its mec. HPLC analyses of his azur II indicated the following composition: methylene blue 63.6%, azur B 28.6%, azur A 4.4%, azur C 1.4%, thionin 1.9%. Azur I was not "pure", but rather a mixture of thionin and all of its 3 and 7 Nmethylated derivatives. Lillie inferred that it was probably prepared by an acid oxidation process. Applications of Giemsa stain reported in the last 32 years are tabulated.
Antecedentes históricosEn 1880, Laveran comunicó (1) sus observaciones sobre lo que se llamó hematozoario y lo postuló como agente causal de la malaria (paludismo): el mérito extraordinario de ellas radica en el hecho de que los microscopios de luz en su época todavía no tenían totalmente perfeccionada la óptica de alta resolución y el condensador de luz de Abbe (que hubiera facilitado la observación sin teñir los parásitos) no se había aún generalizado. Igualmente, Laveran tuvo que vencer la aseveración, generalmente admitida en ese momento, de ser una bacteria el agente causal de la malaria. La tinción diferencial de la cromatina y el citoplasma de los plasmodios mediante el uso de soluciones de eosina amarillenta y de azul de metileno (figura 1, I), esta última envejecida, según la leyenda, con una película superficial de moho, fue publicada por Romanowsky en 1891 (2) y resolvió toda duda que pudiera quedar sobre el papel de los plasmodios como causa directa de la malaria.La siguiente década se caracterizó en este campo por la búsqueda de mezclas colorantes que aseguraran la tinción sistemática de dicha cromatina. Este período ha sido muy bien relatado por Woronzoff-Dashkoff (2), como se resume en el cuadro 1, con otras referencias a trabajos sobre esos colorantes (3-23).
Policromos del azul de metilenoPolicromo significa de muchos colores y, en este caso, se refiere a la capacidad de teñir así que tiene un colorante. Las soluciones de azul de metileno se oxidan lentamente y eso explica el hallazgo de Romanowsky, pero no si...
