An analytical method for determination of the biogenic amines tryptamine, putrescine, histamine, phenylethylamine, tyramine, cadaverine, spermidine and spermine in red and white wines using precolumn derivatization with dansyl chloride (DnsCl) and reversed phase-high performance liquid chromatography with diode array detector (RP-HPLC-DAD) was developed and optimized. The concentration of DnsCl, pH, time of reaction and evaporation under nitrogen were tested and optimized. Best recoveries, ranging from 72 to 102 % were obtained for all analyzed amines applying derivatization with 10 mg/ml of DnsCl for 1 h at 60 ºC and pH 9. The developed method showed excellent linearity with R 2 > 0.99 for all of the tested amines. The accuracy was checked with the standard addition method showing satisfactory recovery, good repeatability and reproducibility. The optimized and validated method was applied for the analysis of white and red wines from Macedonian origin, observing higher total amounts of biogenic amines in red wines. The content of the individual biogenic amines was below the maximal allowed concentration in all tested wines.Keywords: wine; biogenic amines; HPLC; derivatization; dansyl chloride; validation
ОПТИМИЗАЦИЈА И ВАЛИДАЦИЈА НА МЕТОД ЗА АНАЛИЗА НА БИОГЕНИ АМИНИ ВО ВИНА СО ПРИМЕНА НА RP-HPLC-DADРазвиен е и оптимизиран аналитички метод за определување на биогените амини трип-тамин, путрескин, хистамин, фенилетиламин, тирамин, кадаверин, спермидин и спермин во црвени и бели винa со примена на претколонска дериватизација со дансилхлорид (DnsCl) и реверзно-фазна високоефикасна течна хроматографија со детектор со низа од диоди (RP-HPLC-DAD). Концентрацијата на DnsCl, pH, времето на реакцијата и испарувањето со азот беа тестирани и оптимизирани. За сите анализирани амини беа постигнати најдобри аналитички приноси во граници од 70 до 102 %, применувајќи дериватизација со раствор од DnsCl со концентрација од 10 mg/ml, за време од 1 h на 60 ºC и pH 9. Развиениот метод се карактеризира со одлична линеарност со R 2 > 0.99 за сите анализирани амини. Точноста на методот беше проверена со метод на стандарден додаток, при што беа добиени задоволителни вредности за аналитичкиот принос, добра повторливост и репродуцибилност. Оптимизираниот и валидиран метод беше применет за анализа на бели и црвени вина од македонско потекло, при што повисоки вредности на вкупните амини беа забележани во црвените вина. Во сите вина содржината на индивидуалните биогени амини беше пониска од максимално дозволената концентрација.Клучни зборови: вино; биогени амини; HPLC; дериватизација; дансилхлорид; валидација K. Tašev, V. Ivanova-Petropulos, M. Stefova Maced.
