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Neosporose é uma doença parasitária que acomete uma variedade de mamíferos, dentre esses os bovinos, que quando infectados podem apresentar como principais sintomas distúrbios reprodutivos que levam a perdas econômicas significativas para a pecuária de leite e corte. O objetivo deste estudo foi determinar e comparar a ocorrência de anticorpos anti-Neospora caninum em bovinos e cães, avaliando se havia correlação. Os soros foram coletados por meio de venocentese de 87 animais, 75 bovinos leiteiros e 12 cães, de 5 propriedades rurais da microrregião de Fernandópolis/SP, após foram depositados diretamente em tubos sem anticoagulante e armazenados a -20º C até seu processamento pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Os proprietários responderam um questionário para coleta de informações acerca dos animais e da propriedade que permitiram a caracterização do local. A prevalência em bovinos foi de 13,33% e em cães de 25%, sendo que não observou-se correlação entre cães infectados e a presença da doença no rebanho.