High-level amplifications of MYC genes are associated with poor outcomes in childhood medulloblastoma (MB). However, the occurrence of MYCN and MYCC copy number increases below the intense amplification pattern is rarely reported, and its clinical impact has not yet been determined. Here, we describe this phenomenon and its prognostic significance in a cohort of 29 MB patients. Using interphase fluorescence in situ hybridization (I-FISH), low-level copy number alterations, i.e. gain of MYCN, were shown in 5/27 (19%) samples, whereas amplification was revealed in only 1/27 (4%) samples. MYCC gain was revealed in 6/29 (21%) MB, while amplification was disclosed in only 2/29 (7%). Hyperploidy and co-incidence of gains in both MYC loci were frequently observed in samples with copy number aberrations. Survival analysis has clearly shown that MYC copy number increases are associated with lowered event-free survival and overall survival in MB. In the case of MYCN, this negative correlation was statistically significant. We conclude that limited numerical alterations in loci 2p24 (MYCN) and 8q24 (MYCC), as assessed by I-FISH, are present in MB with a higher frequency than high-level amplifications. Poor prognoses were observed in patients with copy number increases in MYC genes. Our data illustrate the importance of further investigations in multicenter trials to better refine the emerging genomic-based prognostic stratification in MB.

hematologická a onkologická klinika, Centrum molekulární bio logie a genové terapie, LF MU a FN Brno 2 Oddělení lékařské genetiky, laboratoř molekulární cytogenetiky, LF MU a FN Brno 3 CEITEC-Středoevropský technologický institut, MU, Brno Souhrn Východiska: Chromozomové změny patří u chronické lymfocytární leukemie (CLL) mezi významné prognostické faktory. Hlavní metodou využívanou k detekci těchto chromozomových změn je fl uorescenční in situ hybridizace (FISH), klasické cytogenetické vyšetření vyžadující buňky v metafázi je u CLL problematické kvůli nízké proliferační schopnosti maligních B-lymfocytů in vitro. V roce 2006 byla publikována metoda umožňující získat metafázní B-lymfocyty u CLL s využitím stimulace pomocí IL-2 a CpG oligonukleotidem DSP30. Cílem naší studie bylo ověřit účinnost stimulace a zhodnotit využitelnost této metody v rutinní praxi. Soubor pacientů a metody: Celkem u 369 pacientů s dia gnózou CLL byla vyšetřována periferní krev klasickou cytogenetickou metodou a současně metodou FISH pro oblasti 13q14, 11q22-23, CEP12 a 17p13. Výsledky: Pro klasické cytogenetické vyšetření se stimulací podařilo získat metafázní buňky u 307 (83 %) z 369 pacientů. Chromozomové změny byly nalezeny u 243 (79 %) ze 307 hodnocených pacientů. Kromě aberací vyšetřovaných metodou FISH byly nalezeny další specifi cké změny v karyotypu např. del(6q), del(14q), t(14;18)(q32;q21), t(11;14)(q13;q32) a t(18;22) (q21;q11). U 103 (42 %) pacientů byly cytogenetickým vyšetřením nalezeny komplexní změny karyotypu, které metodou FISH detekovány nebyly. Závěr: Stimulace pomocí IL-2 a oligonukleotidu DSP30 účinně navozuje dělení maligních B-lymfocytů a umožňuje zachytit velké množství chromozomových změn u CLL, které by při vyšetřování metodou FISH pro základní čtyři aberace zůstaly skryty. Používání této metody v rutinní praxi se osvědčilo hlavně při identifi kaci pacientů s komplexními změnami karyotypu. Klíčová slova cytogenetika-chronická lymfocytární leukemie-interleukin-2-CpG-ODN DSP30-fl uorescenční in situ hybridizace-kultivace-chromozomální aberace Práce byla podpořena grantovými projekty IGA MZ ČR NT11218-6/2010 a NT13493-4/2012, projekty MŠMT OPVK SuPRe-MMe CZ.1.07/2.3.00/20.0045 a VaVPI CEITEC CZ.1.05/1.1.00/02.0068, Českou leukemickou skupinou pro život "CELL" a projektem (Ministerstva zdravotnictví) koncepčního rozvoje výzkumné organizace 65269705 (FN Brno). This study was supported by grants of Internal Grant agency of the Czech Ministry of Health No. NT11218-6/2010 and NT13493-4/2012, projects of Czech Ministry of Education OPVK SuPRe-MMe CZ.1.07/2.3.00/20.0045 and by VaVPI CEITEC CZ.1.05/1.1.00/02.0068, Czech leucemic group for life "CELL" and by project of the Czech Ministry of Health No. 65269705 (FN Brno). Autoři deklarují, že v souvislosti s předmětem studie nemají žádné komerční zájmy.

No abstract