Visceral Leishmaniasis (VL) represents an important global health problem in several warm countries around the world. The main targets in this study are the two nucleoside triphosphate diphosphohydrolases (NTPDases) from Leishmania infantum chagasi that are the main etiologic agent of VL in the New World. These enzymes, called LicNTPDase1 and -2, are homologous to members 5 and 6 of the mammalian E-NTPDase/CD39 superfamily of enzymes. These enzymes hydrolyze nucleotides and accordingly can participate in the purine salvage pathways and in the modulation of purinergic signaling through the extracellular nucleotide-dependent host immune responses. They can therefore affect adhesion and infection of host cells and the parasite virulence. To further characterize these enzymes, in this work, we expressed LicNTPDase1 and -2 in the classical bacterial system Escherichia coli and mammalian cell system COS-7 cells. Our data demonstrate that changes in refolding after expression in bacteria can increase the activity of recombinant (r) rLicNTPDase2 up to 20 times but has no significant effect on rLicNTPDase1. Meanwhile, the expression in COS-7 led to a significant increase in activity for rLicNTPDase1.
Neste estudo aplicamos a dimensão da Especialização da Teoria dos Códigos de Legitimação (TCL) como uma ferramenta metodológica para analisar os discursos de agricultores com diferentes origens de formação do conhecimento especializado envolvido em uma capacitação de técnicas agroflorestais, uma das principais práticas da agroecologia. Foram entrevistados um agricultor familiar (participante da capacitação), um engenheiro agrônomo (técnico da capacitação) e uma agrofloresteira (técnica da capacitação). Cada entrevista foi analisada a partir de três níveis de refinamento das ferramentas desta dimensão: a Especialização – revelando os códigos da especialização; as relações epistêmicas – revelando os insights de conhecimento; e as relações sociais – revelando os olhares dos conhecedores. Estabelecemos uma metodologia de análise considerando os conceitos da TCL. A análise possibilitou compreender como cada um dos atores envolvidos no estudo legitima seu conhecimento e como cada um se legitima como conhecedor dentro do campo. Estudos como este são importantes para trazer o conhecimento agroecológico, através de suas diversas práticas, como objeto de estudo. Os resultados desta pesquisa podem ser ponto de partida a criação de metodologias voltadas para a capacitação de agricultores familiares.
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