Most of the human genome is non-coding. However, some of the non-coding part is transcriptionally active. In humans, the tandemly repeated (TR) pericentromeric non-coding DNA—human satellites 2 and 3 (HS2, HS3)—are transcribed in somatic cells. These transcripts are also found in pre- and post-implantation embryos. The aim of this study was to analyze HS2/HS3 transcription and cellular localization of transcripts in human maturating oocytes. The maternal HS2/HS3 TR transcripts transcribed from both strands were accumulated in the ooplasm in GV-MI oocytes as shown by DNA–RNA FISH (fluorescence in-situ hybridization). The transcripts’ content was higher in GV oocytes than in somatic cumulus cells according to real-time PCR. Using bioinformatics analysis, we demonstrated the presence of polyadenylated HS2 and HS3 RNAs in datasets of GV and MII oocyte transcriptomes. The transcripts shared a high degree of homology with HS2, HS3 transcripts previously observed in cancer cells. The HS2/HS3 transcripts were revealed by a combination of FISH and immunocytochemical staining within membraneless RNP structures that contained DEAD-box helicases DDX5 and DDX4. The RNP structures were closely associated with mitochondria, and are therefore similar to membraneless bodies described previously only in oogonia. These membraneless structures may be a site for spatial sequestration of RNAs and proteins in both maturating oocytes and cancer cells.

No abstract

No abstract

РезюмеАктуальность и цель. Стволовые клетки периодонта -перспективный материал для стоматологии и челюстно-лицевой хирургии. Сигнальный путь Notch является одним из ключевых в отношении поддержания стволовых и дифференцировочных свойств стволовых клеток. Целью данной работы было выяснить, каким образом сигнальный путь Notch влияет на остеогенный потенциал периодонтальных стволовых клеток (СК). Материалы и методы. В работе использовали лентивирусную трансдукцию периодонтальных СК, добавляя различное количества вируса (1, 3, 5, 15 MOI), несущего последовательность, кодирующую активированный внутриклеточный домен рецептора Notch1 -NICD. С помощью метода ПЦР в реальном времени анализировали изменения уровней экспрессии остеогенных маркеров (RUNX2, COL1A1, OGN, POSTN) в зависимости от силы активации сигнального пути Notch. Мы определяли степень активации Notch, детектируя уровень экспрессии гена-мишени -HEY1 -через 48 и 120 часов после индукции остеогенной дифференцировки. Используя методику экстракции красителя ализаринового красного, проводили количественную оценку интенсивности минерализации культур периодонтальных СК на финальной стадии остеогенной дифференцировки. Результаты. Установлено, что активация сигнального пути Notch ведет к усилению экспрессии остеогенных маркеров уже на ранних этапах индукции остеогенной дифференцировки, что, в свою очередь, приводит к развитию финальной стадии остеогенной дифференцировки, характеризующейся формированием кальцификатов. Более того, чем большее количество лентивирусных частиц было использовано при трансдукции клеток, тем,

No abstract