No abstract

No abstract

No abstract

Поступила в редакцию 8 апреля 2016 г., после исправления -13 мая 2016 г.В работе выявлены возможности одновременного определения четырех противотуберкулезных препаратов (ПТП) (этамбутол, пиразинамид, изониазид, рифампицин) методами обращённо-фазо-вой ВЭЖХ (ОФ ВЭЖХ) и ион-парной хроматографии. Предложен вариант одновременного определе-ния этих ПТП в плазме крови человека методом ОФ ВЭЖХ с тандемным масс-спектрометрическим де-тектированием с электроспрей ионизацией. Детектирование осуществляли в режиме положительной ионизации путём мониторинга множественных реакций (MRM). Оптимизированы условия фрагмента-ции для каждого лекарственного вещества. Найдены условия подготовки плазмы крови к ВЭЖХ/МС анализу, включающие осаждение белков плазмы крови ацетонитрилом. Значения степеней извле-чения ПТП составили 85-90 %. Проведена оценка влияния матрицы пробы на разделение и иониза-цию ПТП методом пост-экстракционной добавки. Показано, что разбавление экстракта плазмы кро-ви в 10 раз достаточно для требуемого снижения матричного эффекта. Изучена стабильность ПТП в процессе анализа (автосамплер 1 и 12 ч.) и в условиях хранения (3 цикла заморозка-разморозка). Предложен способ увеличения стабильности рифампицина с добавлением в качестве антиоксидан-та аскорбиновой кислоты (1 мг/мл). Пределы обнаружения с УФ детектированием составили от 2 до 20 мкг/мл, с МС детектированием в SIM-режиме от 2 до 15 нг/мл и в MRM-режиме от 0.5 до 10 нг/мл. В оптимизированных условиях показана возможность обнаружения и количественного определения всех четырех ПТП в плазме крови больного туберкулезом с проводимой лекарственной терапией.Ключевые слова: противотуберкулёзные препараты, ОФ ВЭЖХ, масс-спектрометрическое детектирование, матричный эффект, стабильность рифампицина. In the current study the possibility of the simultaneous determination of anti-tuberculosis (anti-TB) drugs (isoniazid, pyrazinamide, ethambutol and rifampicin) using the reversed-phase HPLC (RP-HPLC) and ionpair chromatography was investigated. A selective and highly sensitive liquid chromatography/tandem mass spectrometry method for the simultaneous determination of four anti-TB drugs (isoniazid, pyrazinamide, ethambutol and rifampicin) in the human plasma was developed. The detection was carried out using the multiple reactionmonitoring (MRM) modes with positive polarity. The fragmentation conditions for each drug were optimized, and the conditions for the blood plasma preparation for HPLC/MS analysis, including the protein precipitation with ACN with a ratio of 3:1 (by volume), were chosen. The matrix effects on the separation and ionization of anti-TB drugs were estimated by the post-extraction additives method. It was shown that the 10-fold dilution