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Zusammenfassung: Durch alleinige Ausnutzung der Kapillarattraktion können in Kapillaren mit einem inneren Durchmesser von weniger als l mm kontinuierliche Gelgradienten erzeugt werden. Dafür werden l-, 2-, 5-oder l (^/-Kapillaren zunächst bis zur Hälfte mit einer AmmoniumperoxodisulfatLösung und anschließend mit einer Lösung der restlichen Gelbestandteile gefüllt. Die konzentrierte Gellösung wird dabei kontinuierlich verdünnt wie durch einpolymerisiertes Protein nach Amidoschwarzfärbung und Mikrodensitometrie gezeigt werden kann. Die Mikro-Gradienten-Gele sind zur Fraktionierung komplexer Proteingemische im Molekulargewichtsbereich von l O 4 bis l O 7 geeignet, da die Acrylamidkonzentration von 1,2 bis zu 40% ansteigt. Die Steigung der linearen Gradienten kann in weitem Umfang variiert und somit verschiedenen Trennproblemen angepaßt werden. Die Fraktionierung beruht überwiegend auf dem Molekularsiebeffekt der kontinuierlich geänderten Porenweite. Unter normalen Elektrophoresebedingungen wandert ein definiertes Protein nur so weit im Gel, bis es den seinem Molekulargewicht entsprechenden Platz erreicht hat. Daher können an Mikro-Gradientengelen auch Molekulargewichtsbestimmungen durchgeführt werden. Micro-electrophoresis on continuous polyaerylamide gradient gels, L Production and quality of gel gradients in capillaries, their application for fractionation of proteins and molecular weight determination.Summary: Utilizing the capillary attraction of 1, 2, 5 or 10 /capillaries are first half filled with capillaries with an inner diameter smaller than 1 mm, it is possible to produce continuous polyacrylamide gradients without using any special equipment. For this the gel mixture is divided into two parts, one containing only ammonium peroxodisulfate and the other containing all other gel constituents.the ammonium peroxodisulfate solution by capillary attraction and then afterwards dipped in the gel mixture which contains all the other constituents. The concentrated gel mixture is thereby continuously diluted. The formation of reproducable linear gradients can be tested by dissolving

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Zusammenfassung: Kontinuierliche PolyacrylamidGradientengele von l -50% in l-, 2-, 5-und 10--Kapillaren sind zur Fraktionierung von 4S-28S-RNA geeignet. Es werden verschiedene Gel-und Puffersysteme für spezielle Trennprobleme, verschiedene Färbemethoden und Mikroextraktionsverfahren zur Präparation der RNA aus l -5 mg Gewebe angegeben. Für eine Elektrophorese genügen ca. 0.1 g einer RNA-Mischung. Kontinuierliche Puffersysteme sind besonders zur Fraktionierung hochmolekularer und diskontinuierliche zur Trennung niedermolekularer RNA geeignet. Im steilen Gelgradienten können auch kleine RNAFragmente bis zum Molekulargewicht 3000 fraktioniert werden. Der Nachweis von Konformationsänderungen ist ebenfalls möglich. Mikrogradienten mit flacher Steigung können zur Darstellung von Ribosomen und ihren Untereinheiten verwandt werden. Micro-electrophoresis in continuous polyacrylamide gradient gels, HI. Extraction and fractionation of ribonucleic acids on micro scaleSummary: Polyacrylamide gels with continuous gradients ranging from 1 -50 % were prepared in 1, 2, 5 and 10-capillaries and were found suitable for fractioning 4S-28S RNA. Different gel and buffer systems for special fractionation problems and several staining procedures are described as well as methods to prepare RNA from 1-5 mg tissue samples. For the electrophoresis of a mixture of RNA approximately 0.1 g is sufficient. Continuous electrophoretic conditions are preferentially used for high molecular weight RNA, whereas discontinuous electrophoresis is suitable for RNA species of low molecular weight. Applying gels with steep gradients (1-50%), fragments of RNA with molecular weights as low as 3000 can be separated. Moreover, conformational changes can be shown. Ribosomes and their subunits can be fractionated on micro gradient gels of acrylamide concentrations ranging from 1 -15 %.

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