Микроинкапсулирование мезенхимных стволовых клеток как инструмент для изучения механизмов клеточной терапии при инфаркте миокарда 1 Северо-Западный федеральный медицинский исследовательский центр им. В. А. Алмазова 194156, Россия, Санкт-Петербург, пр. Пархоменко, д. 15Б 2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И. П. Павлова 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, д. 6/8 3 Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия 197022, Россия, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 14 4 Институт мозга человека им. Н. П. Бехтеревой РАН 197376, Россия, Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, д. 9Реферат Введение. В литературе обсуждаются такие механизмы положительного эффекта клеточной терапии при ишемии миокарда, как прямая дифференцировка трансплантированных стволовых клеток в клетки миокарда, а также стимуляция ангиогенеза и дифференцировки резидентных стволовых клеток сердца паракринными факторами, секретируемыми аутологичными или аллогенными стволовыми клетками при интрамиокардиальном введении. Решению вопроса о вкладе указанных механизмов в итоговый эффект клеточной терапии может способствовать применение такого методического приема, как микроинкапсулирование стволовых клеток. Цель исследования -оценка жизнеспособности и функции мезенхимных стволовых клеток (МСК) после инкапсуляции in vitro и оценка безопасности интрамиокардиальной трансплантации микрокапсулированных МСК in vivo. Материал и методы. Для создания микрокапсул, содержащих МСК красного костного мозга крыс, использовалась система магнитно-механического микроинкапсулирования. В качестве полимерной основы микрокапсулы использовали альгинат натрия в сочетании с различными координирующими агентами (2,2 %-й и 1,2 %-й раствор BaCl 2 , а также 1,5 %-й раствор CaCl 2 ). Стабильность полученных микрокапсул оценивалась в динамике при их инкубации в фосфатном буфере. Жизнеспособность клеток in vitro оценивалась через 30 мин и 5 дней после микроинкапсулирования с помощью витального красителя LIVE/DEAD Kit. Оценка безопасности интрамиокардиальной трансплантации микроинкапсулированных МСК проводилась в экспериментах на самцах крыс стока Wistar массой 225±25 г. Выраженность системной воспалительной реакции оценивалась по изменению уровня лейкоцитов периферической крови. Морфофункциональные показатели сердца оценивались через 5 дней после трансплантации с помощью эхокардиографии. Результаты исследования. В ходе работы были получены альгинатные капсулы с диаметром 225±25 мкм. Использование в качестве координирующего агента 2,2 %-го раствора BaCl 2 продемонстрировало лучшие показатели стабильности микрокапсул (СаCl 2 : набухание -1-й день, полное разрушение -5-й день; BaCl 2 : набухание -14-й день, полное разрушение -более 21 дня), а также выживаемости инкапсулированных клеток (СаCl 2 : через 30 мин -48±4 %, через 5 дней -18±2 %; BaCl 2 : через 30 мин -63±6 %, через 5 дней -71±5 %). Уровень лейкоцитов периферической крови и морфофункциональные показатели сердца после интрамиокардиального введения микр...
