Oreochromis niloticus has skin anticoagulant glycosaminoglycans (GAGs), but their effects on thrombin generation (TG) are unknown. This study partially characterized skin GAGs and analyzed as inhibitors of TG. Papain-extraction yield of 0.1% contained two fractions separated by DEAE-cellulose chromatography, differing on charge density and carboxylated groups by a combination of agarose/polyacrylamide electrophoresis and sequential toluidine blue/stains-all staining, presenting molecular sizes ca. 40 kDa. Depolymerization of the fractions with chondroitin ABC lyase showed dermatan sulfate (DS) as the unique GAG by agarose analysis. Both activated partial thromboplastin time (APTT) and prothrombin time tests only showed anticoagulation by fractions and mammalian DS by APTT (0.61, 0.47 and 1.72 IU, respectively) against heparin (193 IU). Fractions acted concentrationdependent on both intrinsic/extrinsic pathways in TG using 60-fold diluted human plasma, with more than 50% inactivation (41.6 and 83.3 µg), whereas DS and heparin entirely abolished at low amounts. DS from O. niloticus skin blocks in vitro TG in human plasma.Key words: Cichlidae; freshwater fish; sulfated glycans; thrombosis in vitro; waster Inibição da geração de trombina por dermatam sulfato isolado da pele de Oreochromis niloticus RESUMOOreochromis niloticus possui glicosaminoglicanos (GAGs) anticoagulantes de pele, porém desconhecidos são seus efeitos sobre geração de trombina (GT). Caracterizou-se parcialmente GAGs de pele e analisou-se como inibidores de GT. Rendimento de 0,1% da extração com papaína, conteve duas frações separadas por cromatografia de DEAE-celulose, e por combinação de eletroforese de agarose/poliacrilamida e coramento sequencial azul de toluidina/"stains-all", diferiram quanto à densidade da carga e grupos carboxilados, apresentando tamanhos moleculares ca. 40 kDa. Depolimerização das frações com condroitinase ABC mostrou, por análise em agarose, dermatam sulfato (DS) como GAG único. Ambos os testes do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e do tempo de protrombina mostraram anticoagulação, das frações e DS de mamífero, somente pelo TTPA (0,61; 0,47 e 1,72 UI, respectivamente) contra ao da heparina (193 UI). Frações atuaram sobre ambas vias intrínsica/ extrínsica dependente de concentração na GT usando plasma humano diluído 60 vezes, com inativação mais que 50% (41,6 e 83,3 µg), enquanto em quantidades baixas DS e heparina aboliram totalmente. DS da pele de O. niloticus bloqueia GT in vitro no plasma humano. Palavras-chave:Cichlidae; peixe dulcícola; glicanos sulfatados; trombose in vitro; resíduo