Se describió la biología y ecología de cuatro especies medicinales de Gentianella (Gentianaceae), con énfasis en aspectos relacionados con la producción, incluyendo el análisis de flavonoides totales. Todas las especies evaluadas fueron hierbas pequeñas. Gentianella graminea y G. crassicaulis son perennes y G. dianthoides y G. bicolor son anuales. Mientras que G. dianthoides produce abundantes semillas, las otras tienen muy escasa a moderada producción de semillas; todas con bajo poder germinativo. Gentianella crassicaulis produce hasta 90 g de materia seca/ planta, mientras que las restantes menos de 10 g de materia seca/planta. Gentianella graminea presentó niveles significativamente mayores de flavonoides totales en hoja y tallo comparado con G. dianthoides y G. crassicaulis (p < 0,05). Tres especies (G. graminea, G. crassicaulis y G. dianthoides) habitan en la región Jalca (2700 a 2850 m s.n.m.), asociadas a 30 especies (16 también medicinales); mientras que G. bicolor habita en la región Quechua (2600 a 2750 m s.n.m.), asociada a 17 especies (9 medicinales). Las cuatro especies tuvieron poblaciones escasas (≤ 2,5 plantas/m2 ) y su regeneración natural fue baja (1-4 plantas/m2 ). Gentianella dianthoides y G. crassicaulis se encuentran en estado vulnerable de conservación, por lo que se recomienda suspender su recolección.