No abstract

No abstract

Two chromatographic methods, high-performance TLC (HPTLC) and HPLC, were developed and used for separation and quantitative determination of chlorogenic acid in green coffee bean extracts. For HPTLC silica gel Kieselgel 60 F 254 plates with ethyl acetate/dichlormethane/formic acid/acetic acid/water (100:25:10:10:11, v/v/v/v/v) as mobile phase were used. Densitometric determination of chlorogenic acid by HPTLC was performed at 330 nm. A gradient RP HPLC method was carried out at 330 nm. All necessary validation tests for both methods were developed for their comparison. There were no statistically significant differences between HPLC and HPTLC for quantitative determination of chlorogenic acid according to the test of equality of the means.

РезюмеВведение. Оценка фармакокинетического профиля действующих веществ является необходимым этапом разработки лекарственного препарата. Исследованный в работе экстракт представляет собой комплекс биологически активных соединений, выделенных из гонад морских ежей Strongylocentrotus droebachiensis Баренцева моря, содержащий в своем составе пептидные соединения, жирные кислоты, каротиноиды и токоферолы. Выявлена ингибирующая активность экстракта гонад морских ежей в отношении фермента дипептидилпептидазы-4 (ДПП-4). Традиционные подходы к изучению фармакокинетики, основанные на применении хроматографических методов, зачастую не являются эффективными для таких комплексных объектов; альтернативой могут служить методы иммуноферментного анализа. Цель. Цель исследования -поиск подходов к изучению фармакокинетики экстракта гонад морских ежей на кроликах после его перорального введения в трех дозах. Материалы и методы. Для характеристики химического состава образцов экстракта гонад морских ежей и определения содержания возможных целевых аналитов в биопробах использованы спектрофотометрические и хроматографические (ВЭЖХ и ТСХ) методы. Изучение фармакокинетики проводили на самцах кроликов после однократного перорального введения экстракта гонад морских ежей. Была установлена корреляция между его концентрацией в плазме крови и биологической активностью, в качестве маркера которой использована активность фермента ДПП-4. Активность фермента определяли хромогенным оптическим методом. Результаты и обсуждение. Охарактеризованы основные группы биологически активных веществ в составе экстракта гонад морских ежей. Содержание пептидов составило 15-22 %, содержание α-токоферола -0,05-0,15 %, суммарное содержание токоферолов -0,23-0,38 %, содержание каротиноидов -0,005-0,07 %, содержание суммы жирных кислот в пересчете на линоленовую кислоту -11,03-12,74 %. В связи с низким содержанием биологически активных веществ различных классов и отсутствием доминирующих компонентов оптимальным для изучения фармакокинетики признан подход, базирующийся на корреляции между активностью специфического маркера (активность фермента ДПП-4) и концентрацией экстракта в плазме крови. Разработана методика количественного определения экстракта гонад морских ежей в плазме крови кроликов по активности фермента ДПП-4. Методика валидирована по параметрам: селективность, нижний предел количественного определения, диапазон линейности, точность, прецизионность. Изучена фармакокинетика экстракта гонад морских ежей в плазме крови после перорального введения кроликам в диапазоне доз 5-25 мг/кг. Средняя максимальная концентрация (С max ) в зависимости от дозы была 37-115 мкг/мл, площадь под фармакокинетической кривой (AUC 0-24 ) -193-594 ч • мкг/мл, время достижения максимальной концентрации (Т max ) составило 3-3,5 ч, период полувыведения (Т 1/2 ) -7,9-9,9 ч, среднее время удержания (MRT) -11-14 ч. Заключение. С помощью нетрадиционного подхода, основанного на корреляции активности специфического маркера (ДПП-4) и концентрации препарата, охарактеризована фармакокинетика ...

No abstract