Холера -острое диарейное заболевание, вызываемое токсигенными штаммами Vibrio cholerae О1 и О139 серогрупп, по-прежнему остается одной из основных проблем мирового здравоохранения. Не-смотря на существующие методы лечения и улучшение качества питьевой воды, санитарии и гигиены, ежегодно от холеры, по оценкам ВОЗ, умирают около 100000 человек. В последние годы одним из эф-фективных способов предупреждения и ликвидации эпидемий холеры является применение оральных холерных вакцин. Согласно Глобальной дорожной карте ВОЗ, массовая вакцинация должна помочь к 2030 г. добиться снижения смертности от холеры на 90 % в мире и элиминирования заболевания в 20 странах. В обзоре изложены основные исторические этапы создания холерных вакцин: парентераль-ных, химических, инактивированных и живых оральных вакцин.

Investigated have been cultural-morphological, biochemical and genetic properties of lyophilized cultures of F. tularensis 15 NIIEG vaccine strain, accumulated within 60-years term and deposited at the State Collection of Pathogenic Microorganisms of Scientific Center on Expertise of Medical Application Products. The studies undertaken have demonstrated that storing of the strains in such a form at low temperatures, does not prevent changes of their genetic and phenotypic properties to the full extent. It is established that F. tularensis 15 NIIEG strain lyophilized in 1953, 1966, 1969, 2003 and 2012 maintains its immunogenic properties when cultivated on nutrient media Ft-agar with or without addition of blood, based on dissociation rates (87-99 %) of SR-colonies. While F. tularensis 15 NIIEG strain 1990 contains specified amounts (not less than 80 %) of immunogenic colonies if cultivated on nutrient media with the addition of blood, and fails to meet the requirements-if cultivated without. Identified in F. tularensis 15 NIIEG strain 1987 SR-colony decrement of 70-75 % in case of cultivation with or without addition of blood testifies to the deterioration of its immunogenic properties. RAPD and ERIC typing has showed high stability of the genome of F. tularensis 15 NIIEG cultures lyophilized at different times. Tularemia microbe vaccine strain has unique RAPD and ERIC profiles, insignificant alteration of which is observed upon storage of pathogen subculture in the dried from.

Objective of the study was to conduct whole-genome sequencing of the vaccine strain Francisella tularensis 15 NIIEG and determine, based on the results, its phylogenetic relationships and the genetic organization features.Materials and methods. Whole-genome sequencing of F. tularensis 15 NIIEG strain was performed on Ion PGM (Ion Torrent, USA) and MinIon (Oxford Nanopore Technologies, UK) platforms. Alignment of readings obtained to the whole-genome of F. tularensis subsp. holarctica LVS (CP009694, USA, 2015) was performed using the software package DNASTAR Lasergene 15.3. Hybrid assembly of reads into contigs was performed by means of Unicycler v. 0.4.4, using data obtained by semiconductor sequencing technology (Ion PGM) and nanopore sequencing (MinIon). Phylogenetic analysis was performed on the basis of single nucleotide polymorphism (SNPs) data located in the core part of F. tularensis genome. Maximum parsimony algorithm was used to construct a dendrogram using the obtained data of common SNP-matrix.Results and discussion. The close relations of F. tularensis 15 NIIEG strain with F. tularensis LVS vaccine strain used in the countries of Western Europe and North America was confirmed. Searching for common single mutations characteristic of F. tularensis 15 vaccine strains of NIIEG and LVS, permitted to find 5 unique SNPs that distinguish them from all other 228 F. tularensis strains used in the comparison. Comparative genomic analysis ofF. tularensis 15 NIIEG vaccine strain and virulent strains revealed in its structure two extensive 526 bp deletions (genes pilA and pilE) and 1480 bp (genes encoding lipoprotein). Similar deletions are also present in the genome of the F. tularensis LVS vaccine strain.

respectively) stored at the State Collection of Microorganisms of the Scientific Center on Expertise of Medical Application Products. It is established that the majority of cultures has maintained their immunobiological properties. However, it is of note that liophilization does not prevent F. tularensis strain 15 NIIEG from changes in its residual virulence under extended storage. Revealed is the fact that LD 50 for 7 cultures of tularemia microbe strain is within the limits of 100-250 microbial cells (m.c.). At the same time, residual virulence for the strain which dates back 1966 is 7.3·10 5 m.c. Immunogenic activity rates in F. tularensis 15 NIIEG strain cultures range within specified limits. Apart from this, F. tularensis 1987 strain does not comply with the established requirements to the "specific safety", as subcutaneous inoculation with 5·10 9 m.c./ml caused death of Guinea pigs within the scheduled observation time. Demonstrated is the necessity in maintaining constant stability of the original immunobiological properties in Francisella tularensis strain 15 NIIEG under extended storage conditions.

удк 615.371 с.м. суханова, л.В. саяпина, З.е. бердникова, а.с. Тихонова, В.и. климов Проблемы оценки «СтерильноСти» жиВых бактериальных Вакцин ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Российская Федерацияцель исследований -анализ нормативных показателей и методик, используемых при определении наличия посторонних микроорганизмов в живых бактериальных вакцинах. материалы и методы. в работе использовали материалы государственной фармакопеи ссср IX-XI изданий, государственной фармакопеи российской Федерации XII-XIV изданий, а также нд/Фсп на девять наименований живых вакцин. результаты и обсуждение. учитывая специфику живых вакцин, процесс их производства и контроля качества должен направляться на исключение возможности контаминации микроорганизмами, отличающимися от производственных штаммов. установлено, что в настоящее время в российской Федерации отсутствуют единая терминология для обозначения показателя и четкие критерии интерпретации результатов испытания оценки качества живых бактериальных вакцин при определении стерильности/контаминации посторонними бактериями и грибами. в соответствии с требованиями действующих изданий фармакопеи рФ выявление контаминации в живых вакцинах для парентерального введения рекомендовано проводить по различным методикам и критериям оценки (оФс «стерильность» и оФс «микробиологическая чистота»). проведенные исследования определили необходимость совершенствования нормативной базы в части требований к выявлению контаминации посторонними бактериями и грибами. рекомендовано в нормативных документах использовать единое наименование показателя «отсутствие посторонних бактерий и грибов». даны рекомендации по совершенствованию методик и требований к оценке контаминации бактериями и грибами живых бактериальных вакцин. разработанные предложения по гармонизации требований к оценке качества вакцин, содержащих другие живые микроорганизмы, могут использоваться при подготовке соответствующих нормативно-правовых документов (оФс, Фс, нд и др.).Ключевые слова: живые вакцины, оценка качества, контаминация, отсутствие посторонней микрофлоры, стерильность, безопасность.Abstract. Objective of the study -analysis of standard indicators and methods, utilized for determination of presence of contaminating microorganisms in live bacterial vaccines. Materials and methods. We used the data from the State Pharmacopeia of the USSR, 9 th -11 th editions; State Pharmacopeia of the Russian Federation, 12 th -14 th editions; as well as regulatory documentation/manufacturer's pharmacopoeial monographs for 9 items of live vaccines. Results and discussion. Taking into account the specificity of live vaccines, the process of their manufacturing and quality control must target elimination of the possibility of contamination with microorganisms that differ from production strains. It is established that currently there is no unified terminology for determining the indicator in the Russian Federation, as well as clear-cut criteria for interpre...