Adição de alanina, glicina e glutamina ao meio crioprotetor seminal de garanhões Mangalarga Marchador

Abstract

RESUMO -Objetivou-se neste trabalho verificar o efeito da adição de alanina, glicina e glutamina ao meio crioprotetor seminal de garanhões Mangalarga Marchador. Foram utilizados cinco garanhões provenientes do haras Lugavi. Três ejaculados de cada garanhão, após coleta e avaliação, foram divididos em seis tratamentos: sem adição de aminoácidos, adição de 40 mM de alanina, adição de 40 mM de glicina, adição de 60 mM de glutamina, adição de 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina e adição de 40 mM de alanina + 40 mM de glicina + 60 mM de glutamina ao diluente de congelamento convencional. Foram avaliados os parâmetros motilidade total, motilidade progressiva, retidão, linearidade, velocidade média do percurso, velocidade linear, velocidade curvilínea, amplitude lateral de cabeça e frequência de batimentos dos espermatozoides por meio de análise espermática assistida por computador (CASA), funcionalidade da membrana plasmática por choque hiposmótico e integridade de membrana acrossomal pelo teste FITC-PSA. Não houve melhora nos parâmetros de motilidade e cinética espermática nem na funcionalidade de membrana, entretanto, a adição de aminoácidos ao meio crioprotetor seminal aumentou o número de espermatozoides com membrana acrossomal íntegra. Os melhores resultados neste teste são obtidos com 40 mM de alanina (78,6 ± 13,6), 40 mM de glicina (74,7 ± 19,6) ou 7 mM de alanina + 7 mM de glicina + 20 mM de glutamina ejaculates from each stallion were divided into six treatments: without the addition of amino acids, addition of 40 mM alanine, addition of 40 mM glycine, addition of 60 mM glutamine, addition of 7 mM glycine, alanine 7 mM + 20 mM glutamine and addition of 40 mM of glycine + 40 mM of alanine + 60 mM of glutamine to conventional frozen extender. The parameters evaluated were total motility, progressive motility, straightness, linearity, path velocity, progressive velocity, track speed, lateral amplitude and beat frequency by computer assisted sperm analysis (CASA), functionality of plasmatic membrane by hypo-osmotic shock and acrossomal membrane integrity by the FITC-PSA test. No improvement was found in the kinematic parameters and sperm motility and nor in membrane functionality but the addition of amino acids to seminal extender resulted in a higher integrity of the acrossomal membrane. The best results obtained in this test are with 40 mM alanine (78.6 ± 13.6), 40 mM glycine (74.7 ± 19.6) or 7 mM glycine, alanine 7 mM + 20 mM glutamine (76.8 ± 17.5), however, more studies should be conducted to reach the ideal concentration of these components.