Amphiphysin is necessary for organization of the excitation–contraction coupling machinery of muscles, but not for synaptic vesicle endocytosis inDrosophila

Abstract

Amphiphysins 1 and 2 are enriched in the mammalian brain and are proposed to recruit dynamin to sites of endocytosis. Shorter amphiphysin 2 splice variants are also found ubiquitously, with an enrichment in skeletal muscle. At the Drosophila larval neuromuscular junction, amphiphysin is localized postsynaptically and amphiphysin mutants have no major defects in neurotransmission; they are also viable, but flightless. Like mammalian amphiphysin 2 in muscles, Drosophila amphiphysin does not bind clathrin, but can tubulate lipids and is localized on T-tubules. Amphiphysin mutants have a novel phenotype, a severely disorganized T-tubule/sarcoplasmic reticulum system. We therefore propose that muscle amphiphysin is not involved in clathrin-mediated endocytosis, but in the structural organization of the membrane-bound compartments of the excitation-contraction coupling machinery of muscles.

The Crystal Structure of the BAR Domain from Human Bin1/Amphiphysin II and Its Implications for Molecular Recognition

“…As noted above, the protein encoded by the single Amphiphysin gene in the Drosophila genome (44) is believed to be more similar to the ubiquitous human Bin1 isoforms that lack this insertion than to mammalian Amphiphysin I or Amphiphysin II isoforms expressed in the central nervous system. Drosophila Amphiphysin therefore also lacks the 31 amino acid insertion in the BAR domain, and is dispensable for endocytosis and expressed predominantly in muscle, consistent with the notion that its function resembles one of the ubiquitous Bin1 isoforms (16)(17)(18).…”

Postsynaptic Membrane Addition Depends on the Discs-Large-Interacting t-SNARE Gtaxin

“…When DLG expression was further increased using the strong muscle Gal4 driver C57, considerable amounts of DLG accumulated in the cortical network (Fig. 2G-J ) (Thomas et al, 2000;Razzaq et al, 2001). Although the abundance of DLG at NMJs remained primarily unaffected (Fig.…”

Mutations de l’amphiphysine 2 (BIN1) dans les myopathies centronucléaires récessives

“…L'amphiphysine 2 (BIN1) est apparue comme un bon candidat par son implication dans le trafic membranaire, sa régulation par les phosphoinositides et son rôle dans la biogenèse des tubules-T du muscle squelettique [5], ces derniers semblant altérés dans les CNM liées au chromosome X. De plus, il a été montré que l'absence de l'orthologue de BIN1 chez la drosophile conduisait à des anomalies du muscle squelettique [6]. Nous avons tout d'abord identifié une mutation dans BIN1 créant un codon stop prématuré chez un malade atteint de CNM autosomique récessive.…”

“…Après des années de recherches infructueuses pour tenter d'identifier les cibles transcriptionnelles de C/EBPα, il semble qu'en réalité ce facteur ralentisse le cycle cellulaire en inhibant directement dans le foie, les kinases cdk2 et cdk4 [4,5] et potentiellement en interagissant avec les facteurs E2F et Rb (Retinoblastoma). Timchenko et son équipe (Houston, Texas) ont alors mis en évidence, spécifiquement dans le foie de souris âgées (22 mois), un complexe protéique de haut poids moléculaire qui comprend, en dehors du facteur C/EBPα, les protéines E2F4, Rb et Brahma (Brm) [6]. Des expériences d'immuno-précipitation ont alors montré que l'interaction protéique était directe entre C/EBPα et Brm.…”

“…En revanche, et contrairement au foie de souris jeune (8 mois), aucune association n'est retrouvée avec la protéine cdk2. L'augmentation du facteur Brm dans le foie des animaux âgés semble responsable de ce changement de nature des complexes avec l'âge [6]. Brm et cdk intera-…”