Caracterização parcial e utilização da fitase extraída de sementes germinadas de girassol

Abstract

Resumo -O objetivo deste trabalho foi ativar, extrair e caracterizar parcialmente a fitase em sementes germinadas de girassol (Helianthus annuus L.), híbrido M734, e avaliar o efeito da fitase no farelo de girassol. Sementes foram colocadas para germinar por oito dias em câmara a 25°C. A fitase foi extraída com CaCl 2 2%, depois do quinto dia de germinação, e fracionada com (NH 4 ) 2 SO 4 até 80% de saturação. O extrato bruto foi caracterizado parcialmente e aplicado em farelo de girassol desengordurado para avaliar a hidrólise do fitato. Com a germinação, houve aumento na atividade da fitase e redução no teor de fitato. A maior atividade da fitase foi observada do quinto ao oitavo dia de germinação. A fitase das sementes germinadas aos cinco dias apresentou atividade ótima em pH de 5,2 e temperatura de 55ºC. A enzima se manteve estável, quando pré-aquecida por 10 minutos a 50ºC, com V máx de 1,87 U g -1 de amostra e K m de 0,29 mM, indicando alta especificidade pelo fitato. Quando aplicada no farelo de girassol desengordurado, depois de oito horas de incubação, a fitase hidrolisou 92% do fitato. A germinação de sementes de girassol estimula a atividade da fitase, o que facilita sua extração para a produção de alimentos livres de fitatos.Termos para indexação: Helianthus annuus, girassol híbrido, hidrólise de fitato. Partially characterization and application of phytase extracted from germinated sunflower seedsAbstract -The objective of this work was to activate, extract and partially characterize the phytase in hybrid sunflower M734 (Hellianthus annuus). The enzyme was extracted from seeds germinated for eight days, with CaCl 2 2%, fractionated with (NH 4 ) 2 SO 4 up to 80% saturation. The obtained crude extract was partially characterized and applied over defatted sunflower flour in order to evaluate the phytate hydrolysis. In germination, there was an increase in the phytase activity and a reduction of phytate content. The highest enzyme activity was observed from the 5 th to the 8 th day of germination. The phytase extracted from sunflower seeds at the 5 th day of germination presented optimum activity at pH 5.2 and temperature at 55ºC. The phytase was heat stable at 50ºC for 10 minutes, and presented V max of 1.87 U g -1 of substract and K m of 0.29 mM, indicating high specificity to phytate. When applied over defatted sunflower flour, after eight hours of incubation the phytase hydrolyzed 92% of phytate. Sunflower seeds germination stimulates phytase activity, making easy the extraction process, in the production of phytate-free feed products.Index terms: Helianthus annuus, sunflower hibrid, phytate hydrolysis. IntroduçãoAs fosfatases são enzimas amplamente distribuídas na natureza que hidrolisam ésteres fosfatos. A fitase, ou mioinositol-hexafosfato fosfohidrolase, é uma fosfatase fitatoespecífica que catalisa a hidrólise do ácido fítico, ou mioinositol hexafosfato, formando inositol e fosfatos. O ácido fítico é a principal forma de armazenamento de P em sementes e pólen (Reddy et al., 1982). Em virtude d...

Nile Tilapia Fed Enzyme Complex Added at Different Levels and Processing Steps

“…(CHENG;HARDY, 2002). Studying phytase derived from sunflower seeds, Agostini and Ida (2006) verified no loss of phytase activity within a temperature range between 30 to 50 o C. In another study, comparing some sources of the phytase of stemmed cereals, Esmaeilipour et al (2012) observed that the enzyme stability becomes impaired at temperatures above 80 °C, which is close to the extrusion temperature used in this trial.…”

Lowering of phytic acid content by enhancement of phytase and acid phosphatase activities during sunflower germination

“…Hybrid sunflower M734 phytase is heatstable at 50°C for 10 min. When added to deffated sunflower flour after 8h of incubation, it hydrolyzed 92% of phytate (Agostini and Ida, 2006b). Thus, the objective of this work was to investigate the reduction of the PA content in two hybrid sunflowers by enhancing the phytase and acid phosphatase activities during natural germination.…”