Comparação do perfil proteômico através da técnica de espectrometria de massas dos fungos Aspergillus niger E Rhizopus microsporus submetidos à estresse pela adição de cobre.

Abstract

À Deus pelo dom da vida, pela força para vencer cada obstáculo, mesmo enfrentando tantos percalços ao longo do caminho. Aos meus pais Maria Ida Dipre Dias e Ademir Dipalma Dias pela oportunidade da vida, por todo apoio e amor incondicional, mesmo com toda distância sempre estiveram presente em todos os momentos, apoiando-me em cada tropeço e cada sonho realizado. Amo vocês! Aos meus irmãos Mastrangello Dias e Maylla Dias, pela parceria, amor, compreensão em cada etapa da minha vida. Amo vocês! À minha família tios e primos pelo apoio e compreensão em todos os momentos. À minha orientadora, Drª. Maria Anita Mendes, pela confiança, incentivo e oportunidades que me proporcionou ao longo da nossa convivência. Agradeço por compartilhar seu conhecimento e me ensinar tanto, e por me apoiar e incentivar a sempre superar meus limites, obrigada pelo apoio incondicional recebido por todos esses anos, seu profissionalismo é um exemplo a ser seguido. Mas OBRIGADA principalmente a esse ser humano ímpar que eu tenho a honra de ter como amiga, serei eternamente grata a Deus por todos os momentos por nós vividos. Ao Dr. Enrique Eduardo Rozas Sanchez, por todo apoio incondicional, por compartilhar seu conhecimento, por me ensinar tanto, pela parceria de todas as horas e acima de tudo, obrigada por nossa amizade Rocitas!!! À Dr a. Lidiane Maria de Andrade, obrigada por seu apoio minha amiga, desde minha chegada a São Paulo há 7 anos atrás, obrigada pelas noites em claro e finais de semana dedicado ao mundo das "omicas", seu apoio foi fundamental. Obrigada por me ouvir, por me aconselhar, por me acolher com tanto carinho, por compartilhar todos os momentos, isso só fortalece a nossa amizade e cumplicidade. Ao Prof. Dr. Cláudio Augusto Oller do Nascimento, por me proporcionar toda infraestrutura para o desenvolvimento deste trabalho, pela confiança e por ter me acolhido no laboratório DEMPSTER MS LAB no Departamento de Engenharia Química da Escola Politécnica da USP, obrigada pelos ensinamentos e pela amizade. À Dr a. Mariana de Paula Eduardo por compartilhar seu conhecimento e por me ensinar sobre o universo dos fungos, obrigada pelo carinho, parceria, atenção, conversas e amizade. Ao grande amigo Hugo Hashimoto pela parceria, companhia em todas as horas, por me tirar do mundinho USP e me apresentar esta cidade que eu aprendi a amar, obrigada pelas conversas, risadas (e como damos risadas), por compartilhar seus conhecimentos, obrigada por sua amizade japaaaaa boyyyy!

Caracterização do perfil metabolômico e secretômico através da técnica de espectrometria de massas do fungo Aspergillus niger IOC 4687 submetido a estresse pelo sulfato de cobre.

“…A estrutura de um fungo filamentoso consiste em um micélio e esporos. Os fungos usam seus micélios para capturar os substratos e absorverem os nutrientes orgânicos necessários para crescer e sobreviver [23]. Os fungos também podem interagir de forma saudável ou patogênica com os seres vivos, além de apresentarem potencial para o uso industrial, por exemplo, na fabricação de enzimas, antibióticos, biossorventes, agroquímicos e nutricionais [24].…”

“…Dentre a diversidade de fungos filamentosos podemos destacar o gênero Aspergillus sp. Fonte: Dias [23].…”

“…Obteve-se uma biossorção máxima de 43,60 ± 2,81 mg g -1 e 4,44 ± 0,48 mg g -1 em 72 horas nas amostras de 100 e 50 mg L -1 de cobre respectivamente, já em 168 horas têm-se uma biossorção final de 3,00 ± 0,14 mg g -1 e 1,54 ± 0,13 mg g -1 para as amostras de 100 e 50 mg L -1 de cobre na devida ordem. Igualmente como determinado por Dias [23], o período em que ocorre a maior absorção de cobre por essa cepa Aspergillus niger IOC 4687 acontece em 72 horas para ambos os experimentos.…”

“…[23] observou que o tratamento com cobre reduziu a expressão de proteínas da via glicolítica do Aspergillus niger IOC 4687 podendo ser o causador de um menor consumo de glicose ao provocar alterações no ciclo da glicose.Dursun et al[62], observou a inibição do crescimento celular do fungo Aspergillus niger com o aumento das concentrações de cobre nos cultivos do fungo corroborando com os resultados observados neste estudo. O Aspergillus niger IOC 4687 apresentou inibição no crescimento causado pelo cobre ao reduzir a expressão da glutationa (GSH) que necessita de grandes quantidades de energia para sua síntese já que a aclimatação ao estresse demanda energia adicional para produção de enzimas antioxidantes modificando e reduzindo o metabolismo das enzimas de alto consumo energético[56].O estresse causado pelo cobre no fungo Aspergillus niger UCP1261 provocou mudanças na densidade micelial, na textura e espessura das células.…”

“…A redução do pH do meio pode ter interferido pouco na bioacumulação, pois segundo Dursun et al[62], o valor ótimo de pH inicial para o crescimento e acumulação de cobre pelo Aspergillus niger é 5. Nos experimentos foram medidos os pHs em três momentos distintos, início, meio e fim, obtendo-se valores de 4,5 no início, 4,2 na metade e terminando com 4,1.Valores baixos de pH podem causar a dessorção do cobre, no entanto, o valor dos pHs obtidos durante os experimentos permaneceram em torno de 4, esse valor não é suficiente para causar a dessorção do cobre, esse fenômeno de dessorção metálica foi observado por Dias[23] em um pH extracelular de 2,31 para essa cepa Aspergillus niger IOC 4687. . Foram preparadas amostras de controle que continham apenas meio de cultura e cobre (sem microrganismo).…”