Determinación del efecto cicatrizante de Piper aduncum (Matico) en fibroblastos humanos

Abstract

DETERMINACIÓN DEL EFECTO CICATRIZANTE DE Piper aduncum (MATICO) EN FIBROBLASTOS HUMANOS RESUMENObjetivos. Evaluar el efecto cicatrizante del extracto hidroetanólico de Piper aduncum, en una línea celular de fibroblastos Dermales Adultos Humanos (hDFa). Materiales y métodos. El extracto se obtuvo mediante extracción sólido-líquido, fue concentrado y liofilizado. Se purificaron las proteínas del extracto mediante cromatografía líquida de alta eficacia de fase reversa (RP-HPLC); las proteínas fueron identificadas por espectrometría de masas en tándem de péptidos trípticos y se analizaron por MALDI-TOF-TOF en un espectrómetro de masa ABSciex4800. Los valores de concentración efectiva media (EC 50 ), concentración inhibitoria media (IC 50 ), y el porcentaje de proliferación celular; fueron determinados por ensayos con sales de tetrazolio (MTT) . La migración celular se evaluó mediante la "técnica de rayado" . Se analizó la expresión de factores de crecimiento mediante el ensayo de reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa reversa a tiempo real (RT-qPCR). Resultados. La línea hDFa evidenció un IC 50 de 200 µg/mL con el extracto, el valor de EC 50 fue 103,5 µg/mL. En el ensayo de proliferación, la proteína K2; mostró mayor actividad en la proliferación respecto de otros tratamientos (1 µg/mL). En el ensayo de migración de fibroblastos, la proteína K2 mostró mayor actividad (50 µg/mL). La expresión relativa del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) se incrementó 8,6 veces respecto al control, en presencia de la proteína K2. Conclusiones. El extracto hidroetanólico, de Piper aduncum, así como las proteínas que contiene, incrementaron la proliferación y migración de fibroblastos dermales humanos (hDFa); así mismo, aumentaron la expresión de factores de crecimiento que intervienen en el proceso de cicatrización. Palabras clave: Cicatrización de heridas; Péptidos; Piper; Proliferación de la célula; Movimiento celular; Espectrometría de masas (fuente: DeCS BIREME). DETERMINATION OF THE HEALING EFFECT OF Piper aduncum (SPIKED PEPPER OR MATICO) ON HUMAN FIBROBLASTS ABSTRACTObjectives. To evaluate the healing effect of a Piper aduncum ethanol-water extract on an adult human dermal fibroblast cell line (hDFa). Materials and Methods. After obtaining the extract via solid-liquid extraction, concentration, and lyophilization, extract proteins were purified using reverse phase high-performance liquid chromatography, identified using tandem mass spectrometry of tryptic peptides, and analyzed using MALDI-TOF-TOF on an ABSciex4800 mass spectrometer. Half maximum effective concentration values (EC50), half maximum inhibiting concentration (IC50), and percentages of cell proliferation were determined using tetrazolium salt assays. Cell migration was evaluated using a "scratch assay". Growth factor expression in cells was analyzed via quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction. Results. Against the hDFa cell line, the extract had an IC50 of 200 μg/mL and EC50 of 103.5 µg/mL. In the prol...

Actividad biocida del extracto crudo etanólico crudo delPiper elongatum“Matico” en cervicitis en mujeres en edad fértil, como alternativa terapéutica

“…El efecto descrito puede deberse a su composición en proteínas identificadas mediante RP-HPLC, pertenecientes a la superfamilia "STI" de tipo Kunitz (inhibidores de tripsina), los que son inhibidores de proteasas. Las proteínas de la familia Kunitz, se unen con alta afinidad a sitios activos de proteasas y poseen un plegamiento característico, que también está en factores de crecimiento (FGF) e interleuquinas (IL-1β) 13 . Las proteasas en situaciones de herida ocasionan la degradación de la matriz extracelular (ME) y de otras proteínas como factores de crecimiento, en consecuencia, se produce una prolongación de la fase inflamatoria, lo que impide que la herida avance hacia la fase proliferativa 13 .…”

“…Las proteínas de la familia Kunitz, se unen con alta afinidad a sitios activos de proteasas y poseen un plegamiento característico, que también está en factores de crecimiento (FGF) e interleuquinas (IL-1β) 13 . Las proteasas en situaciones de herida ocasionan la degradación de la matriz extracelular (ME) y de otras proteínas como factores de crecimiento, en consecuencia, se produce una prolongación de la fase inflamatoria, lo que impide que la herida avance hacia la fase proliferativa 13 . Por estas razones, las proteínas que presentes en el ECE podrían favorecer el proceso de cicatrización, al tener actividad inhibitoria sobre proteasas 23 .…”

“…Esta especie posee en sus hojas un grupo de compuestos químicos llamados los crómenos, que han evidenciado efectos tóxicos en células y bacterias 29 . Otros metabolitos secundarios presentes son los derivados del ácido benzoico prenilados que poseen actividad anti-bacteriana, citotóxica 5, 13 . El estudio realizado nos conduce a señalar que los componentes bioactivos presentes en el extracto crudo etanólico tienen efecto biocida sobre la CA y CC que afecta al 43.5% de mujeres en Ayacucho 30 , lo que brinda suficiente certeza para continuar estudios farmacológicos avanzados de sus potencialidades frente a este padecimiento, por estos motivos, se recomienda ahondar en el estudio de la actividad farmacológica y la toxicidad del extracto crudo etanólico de P. elongatum y de sus componentes principales, así como determinar los mecanismos de acción de sus metabolitos.…”

“…Se colectaron hojas de matico en el mercado central de Ayacucho y certificadas por el Herbarium huamangesis de la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga (UNSCH), preparando los extractos en el laboratorio de Farmacia y Bioquímica de la misma Universidad. El extracto crudo etanólico (ECE) se obtuvo de 100 g. de hojas desecadas de P. elongatum, maceradas en 500 mL de etanol al 80% por 7 días con agitación constante, luego se filtró y concentró en baño maría hasta lograr un extracto blando [9][10][11][12][13] . Para la preparación de gel al 1% se disolvió 2 g. de carboximetilcelulosa en 100 mL de agua destilada hasta la disolución total, luego se enfrió hasta 40 °C y se añadió 1 g del extracto seco de las hojas de P. elongatum, se mezcló utilizando una varilla de vidrio hasta obtener una suspensión homogénea, luego se agregó 0.03 g de metilparabeno y 0.01g de propilparabeno.…”

Evaluación del efecto cicatrizante del azúcar comercial en comparación con el ácido fusídico en piel de conejos

“…El azúcar posee asimismo propiedades desodorizantes ya que las bacterias usan glucosa en lugar de aminoácidos para su metabolismo, produciendo ácido láctico en lugar de amonio, aminas y compuestos azufrados el azúcar atrae macrófagos, que participan en la "limpieza de la herida", acelerando el desprendimiento de tejido desvitalizado, necrótico y/o gangrenoso, aportando una fuente de energía local y formando una capa proteica protectora en la herida. El azúcar no solo absorbe líquidos del citoplasma de las bacterias, sino de las células superficiales del lecho de la herida [8].…”