Extratos etanólicos de anestesia, Ottonia martiana Miq., foram reavaliados quanto à inibição do crescimento micelial dos fungos Cylindrocladium spathulatum (pinta-preta da erva-mate) e Botrytis cinerea (mofo-cinzento do eucalipto), por meio do planejamento fatorial. A ocorrência de decomposição de bioativos no processo de autoclavagem também foi investigada, por meio de teste de eficiência de extratos filtrados (filtro Millipore) e esterilizados (autoclave) no controle dos fitopatógenos, nas concentrações de 1, 10, 100 e 1000 ppm. Os extratos etanólicos filtrado e esterilizado inibiram o crescimento micelial dos fungos e foram mais ativos frente a B. cinerea.O extrato filtrado exibiu maior potencial antifúngico que o extrato esterilizado. O processo de esterilização por autoclavagem causou pequena decomposição dos bioativos presentes no extrato de anestesia.Palavras-chave: Anestesia; mofo-cinzento; pinta-preta. Abstract Fungitoxic potential of ethanolic extracts of anestesia in the control of phytopathogenic diseases. The antifungal potential of anestesia, Ottonia martiana Miq. was reassessed by factorial design, in vitro testing of fungal mycelial growth compared to the pathogenic isolates Cylindrocladium spathulatum, causal agent of black spot onyerba mate, and Botrytis cinerea causal agent of gray-mold on eucalypts. Occurrence of decomposition of bioactive of the autoclaving process was investigated using foliar detached test compared to the pathogens (1000 ppm). Ethanolic extracts - EBEtOH (filtered and autoclaved) inhibited the mycelial growth of C. spathulatum and B. cinerea (1000 ppm) and were more pronounced against B. cinerea (43.6 % and 68.9 %). EBEtOH filtered (0.22 µm) presented higher activity than EBEtOH autoclaved (C. spathulatum: 52.8 % and 43.6 %, B. cinerea: 68.9 % and 43.6 %), suggesting little decomposition ofbioactive after autoclaving. EBEtOH filtrate presented potential inhibition of 28 % in eucalypt leaves against B. cinerea. Keywords: Ottonia martiana; black spot; gray-mold.