Efeitos da pentoxifilina sobre a viabilidade in vitro dos espermatozóides de eqüinos, após o resfriamento a 5ºC

Abstract

RESUMO -O objetivo deste trabalho foi avaliar, in vitro, o efeito da adição de 1 mg pentoxifilina por mL de amostras seminais diluídas em meio Kenney, e resfriadas a 5º C, de garanhões normospérmicos, sobre os seguintes parâmetros: taxas de motilidade total e motilidade progressiva, velocidade espermática ao longo da trajetória real, índice retilíneo, taxa de linearidade, velocidade progressiva, taxa de viabilidade e taxa de integridade da membrana plasmática. Foram avaliados 20 ejaculados de quatro garanhões, com o auxílio do Hamilton Thorn Research (Animal Version 12.0 L, EUA), em câmara de Makler. A taxa de viabilidade foi realizada por coloração de eosina e microscopia de contraste e a taxa de integridade de membrana, por coloração com fluorocromos, iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceina e microscopia de fluorescência. As análises foram realizadas aos 30, 60, e 120 minutos de incubação a 37º C, após 12, 24 e 48 horas de resfriamento a 5ºC. A pentoxifilina incrementou significativamente, em relação ao grupo controle, os parâmetros espermáticos relacionados à motilidade dos espermatozóides e de integridade da membrana plasmática, durante todo o período de incubação, da seguinte forma: taxa de motilidade total em 8,2%; motilidade progressiva em 4,7%; velocidade real em 23,1 mm/s; taxa de espermatozóides com velocidade rápida em 7,4%; taxa de viabilidade em 4,7%; e integridade da membrana plasmática em 3,5 % do tratado. Quanto aos parâmetros índice de retilinidade e linearidade, não foi observada diferença significativa entre os grupos. Os resultados obtidos nas condições deste experimento indicam que a adição de pentoxifilina ao ejaculado resfriado de garanhões, até 48 horas após o resfriamento, pode ser benéfica à qualidade dos espermatozóides para uso na inseminação artificial.Palavras-chave: sêmen, garanhões, pentoxifilina, motilidade Effects of Pentoxifylline on the in vitro Viability of Equine Spermatozoids, after Cooling at 5ºCABSTRACT -The objective of this work was to evaluate the in vitro effect of the addition of 1 mg pentoxifylline per ml of seminal samples from normospermic stallions, which were first diluted in Kenney extender and cooled at 5ºC. The evaluation was carried out using the following parameters: total and progressive motility rate, track speed, straightness and linearity rate, progressive velocity, viability rate and plasmatic membrane integrity rate. For this experiment, 20 ejaculates from four stallions were examined using Hamilton Thorn Research (Animal Version 12.0 L, EUA) with a Makler camera. The viability rates were obtained using eosin dyes under a light microscope and membrane integrity was obtained by fluorochrom, propidium iodine and carboxyfluorescein diacetat dyes under a fluorescence microscope. The semen examination occurred at 30, 60 and 120 minutes of incubation at 37º C, after 12, 24 and 48 hours of cooling at 5ºC. The pentoxifylline significantly increased the sperm parameter rates of motility and plasmatic membrane integrity for all incubation times, w...

Addition of Pentoxifylline to Skim Milk–Based Extender on Frozen-Thawed Equine Sperm

“…High mitochondrial membrane potential was the characteristic most expected for semen diluted with pentoxifylline because of its relation to high motility [6][7][8]10,12] even after 120 min incubation at 37°C [14]. In addition, in another study, a positive correlation was observed between sperm motility and the addition of pentoxifylline in stallion cryopreserved semen [12] and human semen [13] after thawing.…”

“…Pentoxifylline is a phosphodiesterase inhibitor which increases sperm kinetic characteristics and the number of spermatozoa exhibiting hyperactive motility by raising the intracellular content of cAMP, a molecule involved in the generation of sperm energy [7,9,[10][11][12][13][14]. Studies analyzing the effects of pentoxifylline treatment before freezing may be useful for cryopreservation purposes, improving fertilization rates with assisted reproductive procedures such as intrauterine insemination or in vitro fertilization [11].…”

Espécies Reativas Ao Oxigênio, Antioxidantes E Suas Implicações Na Qualidade Do Sêmen Conservado De Mamíferos Domésticos

“…O uso da pentoxifilina (3,6 mM) como um indutor de funcionalidade, adicionada ao ejaculado equino diluído e resfriado a 5ºC, minimiza o estresse térmico da refrigeração e melhora a maioria dos parâmetros espermáticos, provavelmente devido ao aumento da concentração intracelular de nucleotídeos cíclicos, em especial a AMPc e a guanosina monofosfato cíclica (GMPc) (GOULART et al, 2004). A adição da pentoxifilina (5 mM) ao sêmen humano criopreservado, melhora a motilidade total (40,5% x 55,5%) e progressiva (35,5% x 47%) após a descongelação (ESTEVES et al, 2007).…”

Efeitos da pentoxifilina sobre a qualidade espermática e hemodinâmica uterina em equinos

“…Os resultados variam de acordo com a concentração utilizada (CENTOLA; CARTIE; COX, 1995;BLANES et al, 2004), espécie (SHEN et al, 1991;CALOGERO et al, 1998;ORTIGIES et al, 2012), condição que o sêmen se encontra, fresco, refrigerado (GOULART et al, 2004) Duas décadas depois, um estudo experimental, comparou o efeito de diferentes doses de pentoxifilina no sêmen fresco e criopreservado de humanos, e demonstrou que o maior efeito benéfico foi alcançado a uma concentração de 2,5 mg/mL (aproximadamente 9 mM).…”

“…A pentoxifilina proporcionou além de proteção às células, redução nos radicais livres de oxigênio atuando como fator antioxidante (GOULART et al, 2004).…”