Através da micropropagação na área agrícola as plantas medicinais têm sido bastante difundidas com perspectiva para obtenção de novas espécies que servirão como fonte de compostos biologicamente ativos e aprimoramento da produção de fitofármacos. A luz é um dos requisitos mais importantes para o desenvolvimento de plântulas cultivadas in vitro, pois pode influenciar nos aspectos morfológicos, anatômicos e fisiológicos através da irradiância ou irradiância de fótons que incidem numa superfície como a das folhas e com isso fenômenos biológicos importantes, como a fotossíntese, respondem de maneira diferentes na planta. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a influência de diferentes irradiâncias de fótons no desenvolvimento de três espécies medicinais e aromáticas. O experimento consistiu em um esquema fatorial 3 X 3 com três diferentes irradiâncias de fótons: 35, 45, e 75 μmol.m-2.s-1 em três espécies: Aeollanthus suaveolens Mart. ex Spreng, Hypericum cavernicola L. B. SM e Hypericum teretiusculum A.St.-Hil. Cada tratamento foi composto por 4 repetições e 3 explantes em cada frasco, os segmentos utilizados foram os nodais e apicais. As variáveis analisadas foram número de brotos, altura dos brotos e a concentração da clorofila. Ocorreu diferença estatística significativa entre as diferentes irradiâncias para variável brotação, com a H. teretiusculum se destacando com 9,17 brotos para irradiância de 45 μmol.m-2.s-1 e para a variável altura dos brotos só houve diferença estatística para a espécie A. suaveollens, se destacando com 7,03 cm para irradiância de 75 μmol.m-2.s-1. Para os teores de clorofila, a espécies que apresentaram as maiores médias foram H. cavernicola e H. teretiusculum, com valores de 11,286 (35 μmol.m-2.s-1) e 10,801 (75 μmol.m-2.s-1) respectivamente, seguidas da A. suaveollens com 9,451 para irradiância de 35 μmol.m-2.s-1. Concluindo que as diferentes irradiâncias influenciam o crescimento e a produção dos pigmentos fotossintéticos diferentemente nas espécies medicinais e aromáticas avaliadas.