Effect of Ionic Strength on the Serologic Behavior of Red Cell Isoantibodies*

Abstract

Summary The effect of a low ionic strength environment on the serologic activity of 64 anti‐sera was studied by substituting iso‐osmotic glycine for buffer in the diluent. Some enhancement was achieved with most antibodies, both complete and incomplete, except for antibodies with ABO and Lewis specificity. Red cell sensitization and possibly agglutination of sensitized cells appear to be enhanced in the presence of a low ionic strength milieu. A reduction of ionic strength from 0.26 to about 0.07 results in reducing the antiserum requirement by about one‐half. The most marked enhancement occurred with Rh isoantibodies and the glycine‐antiglobulin technique enhanced significantly the detection of “low grade” Du cells. Enzyme modification and low ionic strength (glycine‐buffer) appear to be equivalent in potentiating antibody activity except that antigens inactivated by enzymes (M) are enhanced by glycine‐buffer and other antigens enhanced by enzymes (Le) are not potentiated by glycine‐buffer. These findings indicate that a low ionic strength diluent is most useful as a supplemental technique and should not displace current techniques until more experience is available. Résumé L'effct d'un milieu de basse force ionique sur l'activité sérologique de 64 antisérums a été étudié en utilisant un tampon iso‐osmotique au glycocolle pour les dilutions. On a observé une augmentation de l'activité de la plupart des anticorps ccmplets et incomplete sauf pour les anticorps de spécificité ABO et Lewis. La sensibilisation des érythrocytes et l'agglutination possible des érythrocytes sensibilisés semble être augmentée en présence de milieu à force ionique basse. Une réduction de la force ionique de 0,26 à 0,07 permet de réduire de moitié la quantité d'anti‐sérum requise. L'augmentation la plus marquée a été obtenue avec les iso‐anticorps anti‐Rhésus et la technique à l'antiglobuline‐glycocolle augmente d'une manière significative la mise en évidence des érythrocytes Du. Les modifications obtenues par les enzymes et par les tampons glycocolles à basse force ionique semblent être équivalentes en ce qui concerne la potentialisation de l'activité des anticorps, sauf pour les antigènes inactivés par les enzymes (M) qui sont augmentés par le tampon glycocolle et les antigènes potentialisés par les enzymes qui ne le sont pas par le tampon glycocolle. Ces faits démontrent qu'un solvant à basse force ionique est surtout utilisable comme une technique complémentaire et qu' il ne doit pas faire écarter les techniques usuelles jusqu'à ce qu'on ait davantage d'expérience à ce sujet. Zusammenfassung Zum Studium des Einflusses eines Milieus mit niederer Ionenstärke auf die serologische Aktivität von 64 Antiseren wurde der Puffer der Aufschwemmungsflüssigkeit durch isoosmotisches Glyzin ersetzt. Mit Ausnahme der ABO‐ und Lewis‐spezifischen Antikürper wurde bei den meisten Antikürpern, sowohl bei kompletten wie auch bei inkompletten, eine Verstärkung der Reaktionen beobachtet. Sowohl die Sensibili‐sierung der Erythrozyten als wahrscheinlich auch ...

Mouse Monoclonal Antibodies with Anti-A, Anti-B and Anti-A,B Specificities; Some Superior to Human Polyclonal ABO Reagents

“…Isotonic saline (0.15 M) is generally used for blood grouping purposes, but it is well known that the rate of the reaction between polyclonal IgG antibodies and anti gen is increased by a reduction of ionic strength from 0.15 to 0.03 M [19,20]. The reaction between purified polyclonal IgM anti-A and A red cells, on the other hand, is not increased in media of low ionic strength [21], The mechanism of changed association rates in media with different ionic strengths is not known and either antigen or antibody could be affected.…”

Observations on Human Antiglobulins

“…Pirofsky [7a,7 b] has shown that non-antibody gammaglobulin is adsorbed onto the surface of human red cells and that such cells do not give a positive antiglobulin test, and recently it has been de monstrated that at very low salt concentration non-antibody gamma globulin is bound to the red cell surface and gives a positive anti globulin test [3]. It follows that both antibody-and non-antibodygammaglobulin can give positive and negative antiglobulin reactions.…”

Immunoelectrophoretic and Serologic Study of the Immunologically Active Components of Bromelin with Rabbit Anti-Bromelin*

“…Two possible modes of action are advanced to explain this observation: 1. the proteolytic property of the enzyme removes material from the surface of the red cell, thus exposing additional antigen [16,18,20], and 2. the enzyme modifies the ionic strength at the site of reaction between the red cell and antibody and leads to increased binding of antibody [8,15,19]. Hughes-Jones et al [12,13] have shown that the treatment of erythrocytes with ficin causes an increase in the value of the equi librium constant as a result of more rapid union of antigen and anti body.…”