Expression des „activated leukocyte cell adhesion molecule“ im Mammakarzinom

Abstract

Das invasive Karzinom der Brustdrü-se ist in den meisten Industrielän-dern die zweithäufigste Todesursache der Frau [1]. Eine Senkung der Mortalitätsrate wird über einen wachsenden Aufwand der Früherkennung und durch Verbesserung der postchirurgischen Therapie angestrebt. Die Modalität der postchirurgischen Therapie ist in hohem Maß vom pathologischen Befund mit Abschätzung der Aggressivität des Karzinoms durch die Bestimmung des Tumortyps, des TNM-Stadiums (T: "tumor", N: "node", M: "metastasis") und des histologischen Differenzierungsgrades abhängig. Neben diesen rein prognostischen Parametern hat die Bestimmung des Hormonrezeptor-und des Her2/neu-Status zudem eine prä-diktive Aussage im Hinblick auf eine antiöstrogene Therapie bzw. Trastuzumab-(Herceptin-)Therapie. Andere Marker, die mit der Prognose der Tumorerkrankung korrelieren, aber keinen prädiktiven Wert besitzen, wurden beschrieben [2]. Es besteht also Bedarf an weiteren prädik-tiven Parametern für die alltägliche klinische Arbeit.Karzinomzellen zeichnen sich u. a. dadurch aus, dass ihre interzelluläre Verbindung herabgesetzt ist. In den zahlreichen Schritten von der Entartung der Zelle bis hin zur manifesten Metastasenbildung spielen die Adhäsionsmoleküle eine wichtige Rolle [3]. Diese können in die Familie der Selektine, Integrine, Cadherine und der Zelladhäsionsmoleküle der Immunglobulingensuperfamilie (Ig-CAM) unterteilt werden. "Activated leukocyte cell adhesion molecule" (ALCAM), auch bekannt als CD166 oder "melanoma-metastasizing clone D" (MEMD), ist ein Glykoprotein der Ig-CAM mit einem Molekulargewicht (MG) Microarray-AnalysenRibonukleinsäure (RNA) wurde mithilfe des RNeasy-Kits (Qiagen) isoliert. Zur Quantifizierung der Transkripte wurden Affymetrix (Santa Clara, CA), HG-U133A Arrays und GeneChip System™ nach Instruktionen der Hersteller verwendet. Proben mit suboptimalen Signalen wurden auf einem neuen Array erneut markiert und hybridisiert. Ergebnisse ALCAM-Expression in der ImmunhistologieActivated leukocyte cell adhesion molecule wird in nichtneoplastischen Brustdrü-sen exprimiert. Innerhalb der terminalen duktulolobulären Einheiten (TDLU) ist eine kräftige membranöse Expression in Western-Blot-AnalysenDie immunhistochemische Farbreaktion ist von zahlreichen Faktoren wie z. B. Fixierungsdauer, Präparatgröße und Art des Gewebes abhängig. Diese Umstände machen die immunhistochemische Quantifizierung für viele Antikörper unzuverlässig. Daher wurden die quantitativen Analysen für ALCAM-Proteine mithilfe der WB-Analysen und für ALCAMmRNA mithilfe der Microarray-Analysen (Affymetrix) durchgeführt. Die WBAnalysen ergaben für ALCAM eine spezifische Bande von MG 90.000-110.000. Die große Bandenbreite ist auf posttranslationale Modifikationen zurückzufüh-ren. Die durchschnittliche, mit der Densitometrie bestimmte Proteinmenge betrug 125,9% (bezogen auf eine Kontrollzelllinie; Daten nicht abgebildet). Microarrays

Mechanisms of transcriptional regulation and prognostic significance of activated leukocyte cell adhesion molecule in cancer

“…With respect to breast cancer, multiple studies have examined ALCAM expression at the transcript and protein levels, using a variety of methods. There is an emerging consensus that low level ALCAM is a bad prognostic marker in breast cancer [23,24,27,41-44]. In the largest, and most recent study, Ihnen et al found that low ALCAM mRNA was associated with shorter disease free survival and duration of survival in hierarchical cluster analysis involving training and multiple validation cohorts of breast cancer patients [44].…”

“…Subsequent studies showed that patients with the lowest level of ALCAM transcripts develop skeletal metastasis [24], that low ALCAM correlated with an aggressive tumor phenotype and significantly negative correlation between ALCAM expression and tumor diameter and grade [25]. More recently high-level ALCAM in breast cancer tissues has emerged as a predictor of good outcome among patients treated with tamoxifen [26] and adjuvant chemotherapy [27,28]. …”

Cloning of the human activated leukocyte cell adhesion molecule promoter and identification of its tissue-independent transcriptional activation by Sp1

“…This consensus is supported by observation that patients with the lowest level of ALCAM transcripts developed skeletal metastasis [29], that low ALCAM correlated with an aggressive tumor phenotype and significantly negative correlation between ALCAM expression and tumor diameter and grade [26]. Conversely, high ALCAM expression correlated positively with progesterone and estrogen receptor expression, better response and longer overall survival in patients treated with adjuvant chemotherapy [28, 30]. Most recently, an independent study has shown that low ALCAM mRNA expression in breast cancer tissue was associated with shorter disease free survival and duration of survival (OAS) in a cohort of 481 patients [31].…”