Justificativa e Objetivos: Desde a introdução, em meados da década de 1980, o teste de HIV melhorou gradualmente, em termos de sensibilidade e especificidade. Visando comparar duas metodologias de teste imunoenzimático (ELISA) de 4ª geração para identificação do vírus da imunodeficiência humana (HIV) foi realizado um estudo das técnicas utilizadas em um centro hemoterápico para sua determinação. Métodos: estudo retrospectivo descritivo das técnicas de ELISA de 4ª geração, onde foram analisados todos os resultados gerados a partir das amostras de sangue obtidas de doadores com idade de 16 a 68 anos conforme a legislação vigente, que compareceram a um banco de sangue regional no período de novembro de 2010 a outubro de 2011. Resultados: A partir de 8.475 amostras colhidas através da doação de sangue, 06 destas foram reagentes ou inconclusivas para testes de triagem, sendo então analisadas por um teste confirmatório, o Western Blot, onde dentre estas apenas uma foi confirmada como reagente para o vírus. Conclusão: Diversos fatores influenciam na positividade de amostras em triagens, tais como, tipo de teste utilizado, janela imunológica, o uso de antirretrovirais, além de fatores biológicos pessoais dos indivíduos infectados. A eficácia dos testes de triagem de HIV deve ser determinada e a metodologia aprimorada a fim de que se possa determinar com segurança a existência ou não de contaminação dos materiais derivados que serão utilizados posteriormente. São necessárias várias pesquisas para aprimorar cada vez mais os testes de triagem e dar a devida ênfase a fatores que se evidenciaram na distorção dos resultados. Backgound and Objectives: Since its introduction in the mid-1980s, HIV testing has gradually improved in terms of sensitivity and specificity. A study was carried out to assess the techniques used in a hemotherapy center for human immunodeficiency virus (HIV) identification using two 4 th-generation enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) methods. Methods: descriptive and retrospective study of 4th-generation ELISA techniques, which analyzed all the results generated from blood samples obtained from donors aged 16 to 68 years, according to current legislation, who attended a regional blood bank from November 2010 to October 2011. Results: Of 8,475 samples collected through blood donation, 06 were positive or inconclusive at the screening tests and were then analyzed through Western Blot confirmatory test, which confirmed one of them was reagent for the virus. Conclusion: Several factors influence positive results of screening samples, such as type of test used, the immunological window, use of antiretroviral drugs, and personal biological factors of infected individuals. The effectiveness of HIV screening tests should be determined and the methodology improved, so that it can establish with certainty the existence or not of contamination of blood products that will be used later. More research is needed to constantly improve the screening tests and give adequate emphasis to factors that have shown to alt...