El género Diatraea Guilding, es considerado el de mayor importancia económica en los sistemas productivos de caña de azúcar en Colombia. Debido al desconocimiento del comportamiento sexual, a la amplia distribución de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1974) y a la variación geográfica de la composición de su feromona sexual, el objetivo de este trabajo fue comprender el comportamiento sexual de esta especie, evaluando el comportamiento de cópula de adultos vírgenes de uno y dos días de edad en laboratorio. Adicionalmente se construyó un etograma para entender el comportamiento sexual de adultos vírgenes de un día de edad. Los estudios fueron realizados bajo condiciones controladas de temperatura y humedad relativa (25 ± 2 °C, y 60 ± 10% de H.R.) y fotoperiodo 12h:12h. El inicio de la cópula se observó desde la sexta hora de escotofase y se mantuvo hasta la décima hora, con una duración entre 30 y 120 minutos. Las parejas evaluadas copularon solamente una vez y no se observó nueva exposición de la glándula por parte de hembras ya copuladas. El acto principal que da inicio al proceso de cópula es el llamado de la hembra, después del cual se desencadenan comportamientos de activación, vuelo, acercamiento, contacto y cópula con una probabilidad de este último de 1.0.