Imobilização Enzimática: Conceito E Efeitos Na Proteólise

Abstract

Recebido em 25/11/2019; aceito em 28/01/2020; publicado na web em 16/04/2020 ENZYME IMMOBILIZATION: CONCEPTS AND EFFECTS ON PROTEOLYSIS. In recent years, great advances have been observed in the proteomic area regarding the different approaches adopted as top-down, middle-down and bottom-up. Regarding middle-down and bottom-up approaches, a previous step for protein digestion is necessary for further analysis of the generated peptides. Classical digestion protocols employing proteases are usually carried out in solution, which can lead to a number of disadvantages such as high digestion time, enzymatic autolysis and impossibility to reuse the enzymes. In view of these drawbacks, different approaches have been studied and applied for improving enzymatic efficiency, inhibition of autolysis, reduction of digestion time, and to minimize the number of missed cleavages. In the literature, great efforts have been made in order to achieve maximum efficiency in enzymatic digestion, with emphasis on proteases immobilization. In this review, concepts related to protein digestion, immobilization techniques, as well as the main support used for enzyme immobilization are discussed considering new tools for proteomic analysis.

Tecnologia enzimática: classificação, imobilização, suportes e aplicações

“…Essas interações podem ser químicas, a partir da formação de ligações covalentes ou ligações cruzadas, ou por métodos físicos, caracterizados por interações mais fracas, como ligações de hidrogênio, forças de Van der Walls e interações hidrofóbicas entre suporte e enzima. Outras formas de imobilização incluem o encapsulamento da enzima no suporte (FURLANI et al, 2020). As diferentes formas de imobilização enzimática podem ser separadas em quatro grupos: Adsorção, ligação covalente, encapsulamento e ligação cruzada (NGUYEN; KIM, 2017).…”

n-Butanol production by Saccharomyces cerevisiae from protein-rich agro-industrial by-products

“…Enzymatic hydrolysis of agro-industrial by-products was performed using a commercial endoprotease produced by Bacillus licheniformis (Alcalase® 2.4 L, Novozyme®, Bagsvaerd, Denmark). This enzyme not only has been present a high protease activity but a considerable resistance to autoproteolysis due to its current production and commercialization with post-translational modifications [12,14]. Tests were carried out in 250-mL Erlenmeyer flasks under moderate agitation using a 1:16 (sunflower meal/water) or 1:10 (poultry offal meal/water) solid-to-liquid ratio.…”

Revestimentos Utilizados Em Nanopartículas Magnéticas Para Imobilização De Enzimas: Uma Revisão

“…Os métodos químicos envolvem a formação de ligações covalentes obtidas pela ligação de éter, tio-éter, amida ou carbamato entre a enzima e o suporte ou ainda através de ligações cruzadas entre a enzima e um agente reticulante. Nos métodos físicos, a enzima quando se liga por adsorção, formando ligações mais fracas com o suporte de imobilização (ligações de hidrogênio, ligação por afinidade, forças de Van der Waals, interações hidrofóbicas e ligação iônica), ou ainda podem ser aprisionadas ou encapsuladas(FURLANI et al, 2020). As interações enzima-suporte na imobilização podem ser vistas na Figura 1.…”