Influência do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) adicionado ao meio fluido sintético de tuba uterina (SOF) sobre a maturação in vitro de oócitos caninos (Canis familiaris)

Machado, M. A.; Toniollo, Gilson Hélio; Oliveira, Kellen

doi:10.5433/1679-0359.2007v28n3p455

Cited by 2 publications

(1 citation statement)

References 8 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Desta forma, a elaboração de um meio de cultivo específico para canídeos é de suma importância para preservar a viabilidade e a morfologia oocitária, indispensáveis para a aquisição da competência meiótica (6) . Em cadelas, os meios mais utilizados para a MIV são o SOF (Synthetic Oviduct Fluid) (7) e principalmente o TCM-199 (Tissue Culture Medium 199) (8) , suplementados com proteínas, hormônios, antioxidantes e fatores de crescimento. O meio TCM-199 tamponado com HEPES [N-(2-hydroxyethyl)-piperazine-N'-(2-ethanesulphonic acid)] é usado comumente como meio de preservação (9) , transporte de oócitos (10) , assim como para a lavagem dos CCOs (11) .…”

Section: Introductionunclassified

Influência Do Hepes Na Maturação in Vitro De Oócitos Caninos Obtidos De Cadelas Em Diestro E Anestro

2019

View full text Add to dashboard Cite

ResumoDiferentemente de outras espécies domésticas, a maturação in vitro (MIV) de oócitos caninos apresenta sucesso limitado. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do HEPES na maturação in vitro de oócitos caninos obtidos de cadelas em diestro e anestro. Os ovários foram coletados, isolados assepticamente e transportados refrigerados a uma temperatura de 4 °C. Os complexos cumulusoócito (CCOs), provenientes das duas fases do ciclo estral, foram submetidos a dois tratamentos: meio TCM-199 com adição de 25 mM de HEPES (GT) e meio sem suplementação (GC). Depois de 72 horas de maturação, os CCOs foram desnudados, fixados e corados com HOESCHT 33342 para avaliação da maturação nuclear. Os oócitos obtidos da fase de anestro e diestro do GT demonstraram, em relação ao grupo GC, maior frequência de oócitos nos estágios de M-II (p<0,01). Comparando-se os diferentes status reprodutivos, observou-se que os oócitos obtidos da fase de diestro apresentaram índices maiores de QVG e M-II. Nossos resultados demonstraram que o HEPES preserva a viabilidade e morfologia oocitária, indispensáveis para a aquisição da competência meiótica, potencializando as taxas de M-II, e que os oócitos obtidos da fase de diestro estão mais aptos a completarem a maturação oocitária. Palavras-chave: meio de cultivo; biotécnicas; ciclo estral; competência meiótica; cadelas. AbstractUnlike other domestic animals, in vitro maturation (IVM) of canine oocytes still has limited success. The aim of this study was to evaluate the effect of HEPES on the in vitro maturation of dog oocytes in anestrus and diestrus. Ovaries were collected, aseptically isolated and transported refrigerated at a temperature of 4°C. Cumulus-oocyte complexe (COCs) from the two phases of estrous cycle were subjected to two treatments: medium TCM-199 with addition of 25 mM HEPES (TG) and medium without supplementation (CG). After 72 h of maturation, COCs were denuded, fixed and stained with Hoechst 33342 to assess nuclear maturation. The oocytes obtained from the anestrus and diestrus phases of the TG showed a higher frequency of oocytes in metaphase II (M-II) (p <0.01) stage.Comparing the different reproductive status, it was observed that the oocytes obtained from the diestrus phase presented higher rates of GVBD (germinal vesicle breakdown) and M-II. Our results showed that HEPES preserves the viability and oocyte morphology essential for the acquisition of meiotic competence, increasing the M-II rates and that the oocytes obtained from the diestrus phase 2 PEREIRA, L.M.C. et al.Cienc. anim. bras., Goiânia, v.20, 1-9, e-53732, 2019 are better able to complete oocyte maturation.

show abstract

Section: Introductionunclassified

Influência Do Hepes Na Maturação in Vitro De Oócitos Caninos Obtidos De Cadelas Em Diestro E Anestro

2019

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

Identificação imuno-histoquímica de VEGF e IGF-1 em ovários de cadelas no anestro e estro

Almeida

Castro

Rial

et al. 2015

Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.

View full text Add to dashboard Cite

Com o objetivo de verificar a presença de VEGF e IGF-1 nos ovários de cadelas, foram realizadas análises imuno-histoquímicas do estroma cortical; teca e granulosa de folículos secundários, terciários e terciários pré-ovulatórios luteinizados; e ovócitos de folículos primários, secundários e terciários de ovários de cinco cadelas em anestro (Anest) e cinco em estro (Est). A identificação das fases do ciclo estral foi realizada por citologia vaginal associada a dosagem plasmática de progesterona. Os ovários foram submetidos a tratamento imuno-histoquímico para identificação de VEGF (anticorpo primário PU 360-UP, Biogenex, USA; diluição 1:30) e IGF-1 (anticorpo primário PabCa, Gro-Pep, Austrália; diluição 1:100). Determinou-se um índice de imunomarcação (IM), para cada tecido avaliado, pela razão entre a área positivamente marcada dividida pela área total analisada. Para os ovócitos, verificou-se imunomarcação positiva ou negativa. As comparações de IM entre tecidos foram realizadas pelo teste de Wilcoxon (diferentes tecidos em mesmo grupo) ou Mann-Whitney (mesmo tecido entre diferentes grupos), todas no nível de 5% de significância. VEGF e IGF-1 foram identificados, de forma semelhante (P>0,05), em todas as estruturas avaliadas em ambos os grupos experimentais. Conclui-se que esses fatores de crescimento estão presentes em cadelas no anestro e estro, no estroma cortical ovariano, folículos em diferentes estádios de desenvolvimento e ovócitos.

show abstract

Influência do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) adicionado ao meio fluido sintético de tuba uterina (SOF) sobre a maturação in vitro de oócitos caninos (Canis familiaris)

Cited by 2 publications

References 8 publications

Influência Do Hepes Na Maturação in Vitro De Oócitos Caninos Obtidos De Cadelas Em Diestro E Anestro

Influência Do Hepes Na Maturação in Vitro De Oócitos Caninos Obtidos De Cadelas Em Diestro E Anestro

Identificação imuno-histoquímica de VEGF e IGF-1 em ovários de cadelas no anestro e estro

Contact Info

Product

Resources

About