Insights into the proteomic profile and gene expression of Lutzomyia longipalpis-derived Lulo cell line

Abstract

BACKGROUND Lutzomyia longipalpis -derived cell line (Lulo) has been suggested as a model for studies of interaction between sandflies and Leishmania . OBJECTIVES Here, we present data of proteomic and gene expression analyses of Lulo cell related to interactions with Leishmania (Viannia) braziliensis . METHODS Lulo cell protein extracts were analysed through a combination of two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry and resulting spots were further investigated in silico to identify proteins using Mascot search and, afterwards, resulting sequences were applied for analysis with VectorBase. RESULTS Sixty-four spots were identified showing similarities to other proteins registered in the databases and could be classified according to their biological function, such as ion-binding proteins (23%), proteases (14%), cytoskeletal proteins (11%) and interactive membrane proteins (9.5%). Effects of interaction with L. (V.) braziliensis with the expression of three genes (enolase, tubulin and vacuolar transport protein) were observed after an eight-hour timeframe and compared to culture without parasites, and demonstrated the impact of parasite interaction with the expression of the following genes: LLOJ000219 (1.69-fold), LLOJ000326 (1.43-fold) and LLOJ006663 (2.41-fold). CONCLUSIONS This set of results adds relevant information regarding the usefulness of the Lulo cell line for studies with Leishmania parasites that indicate variations of protein expression.

Líneas celulares de dípteros: características, aplicaciones y aportes desde Colombia

“…En el 2008 Miranda y colaboradores [114], infectaron células Lulo con la cepa CL044B/84 de L chagasi, y las sometieron a diferentes variables ambientales y fisicoquímicas, dentro de las cuales se encuentran: el porcentaje de SFB, presencia o ausencia de hemolinfa, pH, osmolalidad y temperatura de incubación de las células infectadas; cada condición se evaluó a los días 3, 6 y 9 pi, encontrando los siguientes valores como los óptimos para alcanzar niveles relativamente altos de infección en los 3 días evaluados: SFB al 5 %, con pH a 6.8, osmolalidad de 320 mOsm/Kg e incubados a 28ºC; esto es impor-tante para futuros estudios donde se deseen obtener altas tasas de replicación del parasito [115]. Con esta misma línea celular se han realizado estudios de interacción de diversas especies de parásitos del género Leishmania con las células Lulo [116,117].…”

“…Por otra parte, en Colombia se han venido estableciendo líneas celulares a partir de tejido embrionario de especies de la familia Calliphoridae como Lucilia sericata, Sarconesiopsis magellanica y Calliphora vicina, especies de interés médico y forense; en las cuales se ha descrito la morfología celular de los cultivos, la caracterización citogenética y molecular, el medio de cultivo ideal para el crecimiento, etc. Sin embargo, estas líneas no han sido expuestas a la infección por arbovirus ni por protozoos [55,118,117,19,57]. Por el contrario, se han empleado para el estudio de AMPs de insectos, un ejemplo es la línea celular de Calliphora vicina, en la cual se estudiaron AMPs presentes en el tejido graso y la hemolinfa, donde se destacó la importancia de péptidos como defensina, diptericinas, cecropina y péptidos ricos en prolina; los cuales tienen propiedades antibacteriales (bacterias Gran positivas y Gran negativas) y antifúngicas [110].…”