Isolation and partial characterisation of α-amylase components evolved during early wheat germination

Machaiah, J. P.; Vakil, U. K.

doi:10.1007/bf02702856

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“…The molecular weight of b-amylase appears to be different depending on the species: 54 kDa for amylase from wheat seed; 18 kDa for amylase from wheat germ (Sharma, Sharma, & Gupta, 2000), 50 kDa for amylase from sweet potato (Teotia, Khare, & Gupta, 2001), 55-57 kDa for amylase from pea hypocotyls (Lizotte et al, 1990). There are two iso-amylases in the first stage of barley germination with the molecular weight of 43 kDa and 22.5 kDa (Machaiah & Vakil, 1984). Thus, the molecular weight of amylase differs depending on different origins, species, and development stages of the plants.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 96%

Purification of soybean amylase by superparamagnetic particles

Lin

Kuo

et al. 2009

Food Chemistry

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Section: Discussionmentioning

confidence: 96%

Purification of soybean amylase by superparamagnetic particles

Lin

Kuo

et al. 2009

Food Chemistry

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“…El método que se tuvo en cuenta para la preparación del extracto crudo fue según Machaiah (Machaiah & Vakil, 1984), en la cual, las semillas previamente germinadas fueron trituradas con Buffer fosfato 20mM con 6.7mM de cloruro de sodio a pH, 6.9 atemperado a 4ºC en relación de (1w:5V). El filtrado obtenido se centrifugó a 2000 g durante 20 minutos, descartando el precipitado.…”

Section: Preparación Del Extracto Crudounclassified

“…Nuestro resultado se asemeja a los resultados obtenidos por Machaiah y Espinel donde, su mejor rendimiento de purificación de la α-amilasa lo obtuvieron en el rango de 45 y 70% de saturación respectivamente. (Machaiah, 1984& Espinel, 2009), además, tenemos datos que indican que en la germinación de soja donde usaron el fraccionamiento con sulfato de amonio dio la purificación de 6. Tabla 1: Resumen de la purificación de α-amilasa de semillas germinadas de Chenopodium quinoa var.…”

Section: Determinación Del Tiempo De Germinación Vs La Máxima Activiunclassified

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Purificación Parcial y Caracterización de Alfa Amilasa de granos germinados de Chenopodium quinoa (Quinua)

2018

Rev. ECIPeru

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ResumenLas alfa amilasas son las enzimas más estudiadas e importantes en el campo biotecnológico e industrial; ya que han reemplazado por completo la hidrólisis química del almidón. Estas enzimas son imprescindibles en la elaboración de productos alimenticios, combustibles, medicamentos y detergentes con la finalidad de optimizar procesos y conservar el medio ambiente. La α-amilasa puede ser purificada de diferentes organismos como plantas, animales, hongos y bacterias; actualmente un gran número de α-amilasas bacterianas en especial del género Bacillus están disponibles comercialmente y son las más utilizadas en las industrias. Sin embargo, la producción de éstas no satisfacen los requerimientos industriales en el mundo; ya que, la demanda de esta enzima se ha incrementado en los últimos dos años y el empleo de α-amilasas bacterianas ha provocado alergias afectando al 15% de la población a nivel mundial. . En este estudio, como fuente de α-amilasa se emplearon semillas de Chenopodium quinoa (quinua) var hualhuas blanca durante el proceso de germinación; esta enzima fue parcialmente purificada por precipitación con sulfato de amonio obteniendo una actividad específica final de 35.60U/mg y un grado de purificación de 5 veces. La purificación fue confirmada por SDS-PAGE, encontrando un peso molecular de 44kDa. La actividad enzimática se evaluó mediante el método de Miller mostrando máxima actividad a pH 7 y a temperatura de 37ºC. La linealización de Lineweaver-Burk nos dio un Km de 16mg/mL y Vmax de 100µM de maltosa/min. Por lo tanto, esta caracterización reúne los pre-requisitos necesarios para la aplicación en la industria. Descriptores: Chenopodium quinoa; alfa amilasa; germinación; purificación parcial. AbstractThe alpha amylases are the enzymes most studied and important in biotechnology and industry; because they have completely replaced the starch's chemical hydrolysis. These enzymes are essential in the food production, medicines and detergents in order to optimize processes and conserve the environment. The αamylase can be isolated from different organisms such as plants, animals, fungi and bacteria, now a large number of bacterial α-amylases especially from genus Bacillus are commercially available and they are the most used in industry. However, the production of these do not meet industry requirements in the world, because the demand for this enzyme has increased in the last two years and the use of bacterial α-amilase has caused allergies affecting the 15% of the global population. In this study, as a source of α-amylase used the seeds from Chenopodium quinoa (quinoa). Var. white hualhuas during the germination process, this enzyme was partially purified by ammonium sulfate precipitation to obtain a final specific activity of 35.60U/mg, and a grade of purification of 5 times. The purification was confirmed by SDS-PAGE, where the molecular weight was 44kDa. The enzyme activity was evaluated by Miller method showing maximum activity at pH 7 and 37ºC. The Lineweaver-Burk linearization shows a Km of 16mg/m...

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α-Amylase from wheat (Triticum aestivum) seeds: Its purification, biochemical attributes and active site studies

Singh

Kayastha

2014

Food Chemistry

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Isolation and partial characterisation of α-amylase components evolved during early wheat germination

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Purification of soybean amylase by superparamagnetic particles

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Purificación Parcial y Caracterización de Alfa Amilasa de granos germinados de Chenopodium quinoa (Quinua)

α-Amylase from wheat (Triticum aestivum) seeds: Its purification, biochemical attributes and active site studies

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