Isolation, Characterization, and Differentiation Potential of Canine Adipose-Derived Stem Cells

Abstract

Adipose tissue may represent a potential source of adult stem cells for tissue engineering applications in veterinary medicine. It can be obtained in large quantities, under local anesthesia, and with minimal discomfort. In this study, canine adipose tissue was obtained by biopsy from subcutaneous adipose tissue or by suction-assisted lipectomy (i.e., liposuction). Adipose tissue was processed to obtain a fibroblast-like population of cells similar to human adipose-derived stem cells (hASCs). These canine adipose-derived stem cells (cASCs) can be maintained in vitro for extended periods with stable population doubling and low levels of senescence. Immunofluorescence and flow cytometry show that the majority of cASCs are of mesodermal or mesenchymal origin. cASCs are able to differentiate in vitro into adipogenic, chondrogenic, myogenic, and osteogenic cells in the presence of lineage-specific induction factors. In conclusion, like human lipoaspirate, canine adipose tissue may also contain multipotent cells and represent an important stem cell source both for veterinary cell therapy as well as preclinical studies.

Estudo comparativo da diferenciação osteogênica das células tronco mesenquimais da medula óssea e do tecido adiposo de cães adultos

“…De forma semelhante a elevada expressão de CD29, marcador de CTM não é expresso por fibroblastos caninos , corrobora com o isolamento de CTM e exclui a possibilidade do isolamento de fibroblastos, principalmente das culturas extraídas do tecido adiposo. Outros marcadores de CTM podem também ser utilizados em cães como CD44 (Vieira et al 2010), CD33, CD105, CD184, OCT4 (Seo et al 2009), CD140a, CD117 (Martinello et al 2011), CD56, CD146, CD271 (Rozemuller et al 2010), mas não haviam, na época do experimento, anticorpos específicos para cão disponíveis no mercado. A menor conversão de MTT em cristais de formazan observada nas CTM submetidas à diferenciação osteogênica no presente estudo quando comparadas às CTM cultivadas em meio basal, sugerem menor atividade mitocondrial nos grupos submetidos à diferenciação, o que também foi observado em CTM de ratos (Boeloni et la.…”

“…A sialoproteina óssea pode ser expressa por pré-osteoblastos e osteoblastos (Datta et al 2008). O aumento da sua expressão também já foi relatado durante o processo de diferenciação osteogênica de CTM--AD em cães (Vieira et al 2010). A osteocalcina é uma glicoproteína específica do tecido ósseo que atua promovendo a mineralização da matriz.…”

“…A extração das células tronco mesenquimais de tecido adiposo foi realizada segundo o protocolo descrito a seguir que foi adaptado de protocolos estabelecidos por Neupane et al (2008) e Vieira et al (2010.…”

“…A medula óssea e o tecido adiposo (Vieira et al 2010) são considerados os principais sítios para obtenção dessas células, devido à maior quantidade e facilidade de colheita e isolamento. No entanto, ainda não se sabe ao certo qual delas é a melhor fonte de CTM para terapias de regeneração óssea.…”

Isolation, Culture, Identification and Differentiation of Canine Amniotic Mesenchymal Stem Cells in Vitro

“…With self-renewal and multiple differentiation capability, MSCs under different induction conditions can differentiate into kinds of somatic cell types including osteoblast, neurocyte and pancreatic cells Vieira et al, 2010;. MSCs were originally obtained from bone marrow (Kortesidis et al, 2005).…”